СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ С.-Х. ПТИЦ С ПОМОЩЬЮ ПОЛИКАТИОННОГО СОЕДИНЕНИЯ "ТРИВИРОН" (TRIVIRON)

Название	СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ С.-Х. ПТИЦ С ПОМОЩЬЮ ПОЛИКАТИОННОГО СОЕДИНЕНИЯ "ТРИВИРОН" (TRIVIRON)
Разработчик (Авторы)	Сильников В.Н., Королева Л.С., Буракова Е.А. Яринич Л.А., Коротченя И.Н., Лухвич К.А., Кобурнеев И.В., Гинзбург А.С.
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2532355
Дата регистрации	10.07.2013
Правообладатель	Общество с ограниченной ответственностью "Пробиотик Центр"
Медаль имени А.Нобеля

Описание изобретения

Изобретение относится к области ветеринарной вирусологии и предназначено для лечения у сельскохозяйственной птицы вирусных заболеваний, в основе которых лежат РНК вирусы (вирусы гриппа, острая респираторная инфекция, гепатит, синий гребень, инфекционный энтерит, трансмиссивный энтерит, реовирусный энтеронефрит, теносиновит, вирусный артрит, инфекционный бронхит кур, болезнь Гамборо, пневмовирус и т.д.).

В настоящее время известен ряд противовирусных препаратов (они принадлежат к различным классам химических соединений), рекомендуемых к применению в медицинской практике. Однако вследствие их высокой стоимости только некоторые из них испытаны в качестве терапевтических средств при вирусных заболеваниях, как правило при лечении дорогостоящих пород собак и кошек. В ряде случаев, когда отсутствуют препараты, специфичные для конкретных вирусных инфекций, для лечения вирусных заболеваний используются иммуномодуляторы. Однако такие препараты, применяемые в медицинской практике, также имеют высокую стоимость, что исключает возможность их широкого применения в ветеринарной практике.

Соединения, способные расщеплять РНК (искусственные РНКазы), обладают противовирусной активностью в отношении РНК, содержащих вирусы (Goncharova Е.Р. et. al. Inactivation of the tick-borne encephalitis virus by RNA-cleaving compounds // J. Mol. Gen. Med., 2011, V. 5, P. 266-272; Fedorova A.A. et.al. Inactivation of a non-enveloped RNA virus by artificial ribonucleases: Honey bees and acute bee paralysis virus as a new experimental model for in vivo antiviral activity assessment // Antiviral Res. 2011 V. 91, P. 267-277; RU 2399388, 20.09.2010). В частности, искусственные РНКазы на основе производных 1,4-диазабицикло[2.2.2]октана, а именно 1,5-бис-(4-додецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан дихлорид дибромид, обладают противовирусной активностью по отношению к вирусам гриппа A/WSN/33 (H1N1) и вирусу клещевого энцефалита (штамм Софьин, RU 2399669, 20.09.2010). Однако концентрация этого соединения, необходимая для инактивации указанных вирусов, составляла 20 мкМ, что почти в два раза превышало концентрацию, при которой наблюдались токсические эффекты на клеточной культуре (12 мкМ).

Некоторые другие производные бисчетвертичных солей 1,4-диазабицикло[2.2.2]октана, будучи ковалентно присоединенными к различного рода поверхностям, придают полученным таким образом материалам противовирусные свойства.

Известен препарат Арговит (RU 2147237, 10.04.2000). Данный препарат обладает широким спектром антимикробного действия в отношении грамположительных и грамотрицательных бактерий. Проявляет вирулицидную (противовирусную) и фунгицидную (противогрибковую) активность. К недостаткам, помимо высокой стоимости, следует отнести тот факт, что препарат выпускается в виде стабилизированного концентрированного 20% раствора (содержание серебра в арговите в пересчете на 100% сухой препарат составляет 5-7%). Форма выпуска препарата накладывает значительные ограничения на условия и сроки хранения препарата. Так, при длительном хранении и особенно под воздействием таких факторов, как свет, колебания температуры, замораживание, происходит агрегация кластерных частиц с образованием коллоидных, малоактивных частиц серебра. Возможно также появление пленки металлического серебра на поверхности концентрата. Частицы серебра не всасываются, что также ограничивает терапию системных и респираторных вирусных инфекций птиц путем выпаивания препарата.

Наиболее близким аналогом заявленного изобретения является способ профилактики и лечения болезней птиц бактериальной и вирусной этиологии, в котором больной птице закапывают в клюв по 1-7 крупинок в растворенном виде комплексное гомеопатическое средство, содержащее Lachesis, Echinacea, Aconitum, Bryonia, Belladonna, взятые поровну, через 0,5-6 ч в течение 1-6 недель (RU 2209076, 27.07.2003).

Техническим результатом настоящего изобретения является расширение арсенала противовирусных средств для нужд ветеринарии, повышение эффективности лечения вирусных заболеваний у сельскохозяйственной птицы, в основе которых лежат РНК вирусы, и обеспечение возможности профилактики и лечения данных заболеваний, после того как они уже возникли, а также возможность делать это используя ввод через систему поения перорально, а не путем инъекций внутримышечно.

Указанный технический результат достигается в способе лечения вирусных заболеваний птиц, вызванных РНК вирусами, в котором в организм птиц вводят поликатионное соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида, которое растворяют в муравьиной 85%-ной кислоте, доводя концентрацию до 3 грамм на 1 литр кислоты, получая маточный раствор, затем маточный раствор разводят водопроводной водой до концентрации 10 мл маточного раствора на 1 литр воды и вводят перорально птице.

Соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00015 мл маточного раствора на 1 голову птиц в первые 3 дня и 0,0003 мл маточного раствора в течение последующих двух дней.

Соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,0003 мл маточного раствора на 1 голову птиц в первые 5 дней и 0,00045 мл маточного раствора на голову птиц в течение последующих двух дней.

Соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00045 мл маточного раствора на голову птиц в первые 5 дней и 0,0009 мл маточного раствора в течение последующих трех дней.

Соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00045 мл маточного раствора на голову птиц в первые 5 дней и 0,001 мл в течение последующих двух дней.

Соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00045 мл маточного раствора на голову птиц в первые 5 дней и 0,0009 мл в течение последующих пяти дней.

Соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00025 мл маточного раствора на голову птиц в первые 5 дней и 0,001 мл в виде маточного раствора в течение последующих трех дней.

Соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00025 мл маточного раствора на голову в первые 5 дней и 0,001 мл в течение последующих двух дней.

Соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00025 мл маточного раствора на голову птиц в первые 6 дней и 0,001 мл в течение последующих трех дней.

Введение препарата 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида осуществляют следующим образом.

Сначала готовят маточный раствор путем растворения препарата в муравьиной 85%-ной кислоте, доводя концентрацию до 3 грамм препарата на 1 литр кислоты, потом маточный раствор разводят водопроводной водой до концентрации 10 мл маточного раствора на 1 литр воды. Разведенный с водой маточный раствор вводится в систему водопоения, обеспечивая дозировку маточного раствора =0,00015-0,001 мл на голову в день в течении 5-10-ти дней.

Соединение в нерастворенном виде хранится и сохраняет свои свойства в течении 3-х лет.

В отличие от аналогов вводится перорально, что делает возможным применение его в промышленном птицеводстве для лечения вирусных заболеваний птиц.

Поликатионное соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида (C₄₇H₁₀₀Br₄N₄) относится к классу поликатионных насыщенных гетероциклических соединений, содержащих гидрофобные алкильные фрагменты, и является производным 1,4-диазабицикло[2.2.2]октана и имеет следующую структурную формулу:

Ниже приведена схема синтеза 1,5-бис-(4-додецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида (I) (далее препарат в сухом виде либо в растворенном в 85%-ной муравьиной кислоте с названием "TRIVIRON"):

Способ синтеза/получения производного 1,4-диазабицикло[2.2.2]октана со структурной формулой

заключается в том, что синтез осуществляют при 55°C в течении 24 ч и мольном соотношении следующих компонентов: 1,5-дибромпентана - бромид 1-тетрадецил-4-аза-1-азониабицикло[2.2.2]октана 1:2,16, в метаноле как растворителе, с выходом целевого соединения, превышающим 89%.

Пример получения препарата "TRIVIRON" (поликатионного соединения 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида (I)).

Бромид 1-тетрадецил-4-аза-1-азониабицикло[2.2.2]октана (26,3 г, 65 ммоль) растворяют при нагревании до 55°C в 20 мл метанола. К раствору при перемешивании на магнитной мешалке добавляют двумя порциями с интервалом 12 ч 1,5-дибромпентан (6,9 г, 30 ммоль). После добавления последней порции реакционную смесь перемешивают 24 ч при 55°C. После охлаждения до комнатной температуры (18-22°C) к реакционной смеси добавляют 20 мл ацетонитрила, выпавший осадок отфильтровывают и высушивают в вакууме (17,5 г, 56%). Маточный раствор упаривают на ротационном испарителе, к вязкому сиропообразному остатку добавляют 40 мл ацетонитрила, перемешивают на магнитной мешалке при кипении с обратным холодильником 1 ч. После охлаждения до комнатной температуры (18-22°C) выпавший осадок отфильтровывают и высушивают в вакууме (10,3 г, 33%). Полученные осадки объединяют. Выход 27,8 г (89,1%).

Спектр ЯМР ¹H, δ, м.д. (J, Гц): 0.93 (уш. т, 6Н, CH ₃(CH₂)₁₁N⁺, J 6.6), 1.32-1.45 (м, 36H, CH₃(CH ₂)₉CH₂CH₂N⁺); 1.32 (м, 2H, ⁺NCH₂CH₂CH ₂CH₂CH2N⁺); 1.88 (м, 4H, CH₃(CH₂)₉CH ₂CH₂N⁺); 1.98 (м, 4H, ⁺NCH₂CH ₂CH₂CH ₂CH₂N⁺); 3.62 (м, 4H, CH₃(CH₂)₁₀CH ₂N⁺); 3.75 (м, 4H, CH₂CH ₂N⁺); 4.07-4.12 (м, 24H, ⁺N(CH ₂CH ₂)₃N⁺).

Спектр ЯМР ¹³C, δ, м.д.: 12.95 (2C, CH₃(CH₂)₁₁N⁺); 21.64 (2C, CH₃ CH₂(CH₂)₁₀N⁺); 22.21 (2C, CH₃CH₂ CH₂(CH₂)₉N⁺); 25.63 (4C, ⁺NCH₂ CH₂CH₂ CH₂CH₂N⁺, CH₃(CH₂)₂ CH₂(CH₂)₈N⁺); 28.66 (2C, CH₃(CH₂)₃ CH₂(CH₂)₇N⁺); 28.95 (4C, CH₃(CH₂)₄ CH₂ CH₂(CH₂)₅N⁺); 29.10 (3C, ⁺N(CH₂)₂ CH₂(CH₂)₂N⁺, CH₃(CH₂)₆ CH₂CH₂(CH₂)₃N⁺); 29.21 (2C, CH₃(CH₂)₈ CH₂(CH₂)₂N⁺); 31.54 (2C, CH₃(CH₂)-CH₂CH₂N⁺); 64.24 (2C, CH₃(CH₂)₁₀ CH₂N⁺); 50.81 и 51.03 (6C, ⁺N(CH₂ CH₂)₃N⁺); 64.71 (2C, CH₂ ⁺N(CH₂CH₂)₃N⁺).

Препарат "TRIVIRON" применяется для профилактики и/или лечения вирусных заболеваний сельскохозяйственной птицы, в основе которых лежат РНК вирусы, данный препарат вводят перорально, что позволяет существенно оздоровить птицу, снизить ее падеж, исключить задержку привесов и т.п.

Таким образом, препарат "TRIVIRON" обладает выраженным противовирусным действием по отношению к вирусным заболеваниям птиц, в основе которых лежат РНК вирусы.

Использование препарата "TRIVIRON" позволяет справляться с большим спектром инфекционных заболеваний, в основе которых лежат РНК вирусы. Эффективность его подтверждается большим количеством проведенных экспериментов на фабриках. Отличительной особенностью его является возможность не профилактировать и лечить данные заболевания, после того как они уже возникли, а также возможность делать это используя ввод через систему поения перорально, а не путем инъекций внутримышечно. К преимуществом относится также отсутствие побочных эффектов.

Формула изобретения

1. Способ лечения вирусных заболеваний птиц, вызванных РНК вирусами, характеризующийся тем, что в организм птиц вводят поликатионное соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида, которое растворяют в муравьиной 85%-ной кислоте, доводя концентрацию до 3 грамм на 1 литр кислоты, получая маточный раствор, затем маточный раствор разводят водопроводной водой до концентрации 10 мл маточного раствора на 1 литр воды и вводят перорально птице.

2. Способ по п.1, характеризующийся тем, что соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00015 мл маточного раствора на 1 голову птиц в первые 3 дня и 0,0003 мл маточного раствора в течение последующих двух дней.

3. Способ по п.1, характеризующийся тем, что соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,0003 мл маточного раствора на 1 голову птиц в первые 5 дней и 0,00045 мл маточного раствора на голову птиц в течение последующих двух дней.

4. Способ по п.1, характеризующийся тем, что соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00045 мл маточного раствора на голову птиц в первые 5 дней и 0,0009 мл маточного раствора в течение последующих трех дней.

5. Способ по п.1, характеризующийся тем, что соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00045 мл маточного раствора на голову птиц в первые 5 дней и 0,001 мл в течение последующих двух дней.

6. Способ по п.1, характеризующийся тем, что соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00045 мл маточного раствора на голову птиц в первые 5 дней и 0,0009 мл в течение последующих пяти дней.

7. Способ по п.1, характеризующийся тем, что соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00025 мл маточного раствора на голову птиц в первые 5 дней и 0,001 мл в виде маточного раствора в течение последующих трех дней.

8. Способ по п.1, характеризующийся тем, что соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00025 мл маточного раствора на голову в первые 5 дней и 0,001 мл в течение последующих двух дней.

9. Способ по п.1, характеризующийся тем, что соединение 1,5-бис-(4-тетрадецил-1,4-диазониабицикло[2.2.2]октан-1-ил)пентан тетрабромида вводят из расчета 0,00025 мл маточного раствора на голову птиц в первые 6 дней и 0,001 мл в течение последующих трех дней.

Изобретение "СПОСОБ ЛЕЧЕНИЯ С.-Х. ПТИЦ С ПОМОЩЬЮ ПОЛИКАТИОННОГО СОЕДИНЕНИЯ "ТРИВИРОН" (TRIVIRON)" (Сильников В.Н., Королева Л.С., Буракова Е.А. Яринич Л.А., Коротченя И.Н., Лухвич К.А., Кобурнеев И.В., Гинзбург А.С.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога