XVLII международная выставка-презентация
научных, технических, учебно-методических и литературно-художественных изданий

СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЕРЕЖИВАЮЩИХ СРЕЗОВ ПИРИФОРМНОЙ ДОЛИ МОЗГА


НазваниеСПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЕРЕЖИВАЮЩИХ СРЕЗОВ ПИРИФОРМНОЙ ДОЛИ МОЗГА
Разработчик (Авторы)Ахмадеев А.В., Калимуллина Л.Б.
Вид объекта патентного праваИзобретение
Регистрационный номер 2438193
Дата регистрации25.12.2007
ПравообладательГосударственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Башкирский государственный университет"
Область применения (класс МПК)G09B 23/28

Описание изобретения

Изобретение относится к области медицины, а именно к нейробиологии. Для приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга иссекают ткани по форме эллиптического параболоида под углом от 18 до 22 градусов к продольной оси мозга с последующей инкубацией в питательной среде. При иссечении производят одномоментную дифференциацию пириформной доли мозга на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса. Способ позволяет провести одномоментную дифференциацию пириформной доли мозга на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса при иссечении пириформной доли мозга. 1 ил.

Изобретение относится к медицине, а именно к нейробиологии.

Известен способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга И.Г.Акмаев, Л.Б.Калимуллина. Миндалевидный комплекс мозга. М., «Наука», 1993, стр.177-181, в котором иссечение пириформной доли мозга, включающей миндалевидный комплекс, осуществляют специальным резцом, выполненным в форме эллиптического параболоида. При этом угол иссечения устанавливают от 18-22 градусов к продольной оси мозга.

Недостатком этого способа является невозможность одномоментной дифференциации иссекаемого миндалевидного комплекса на кортикомедиальный и базолатеральный отделы.

Наиболее близким является изобретение по А.С. №1679246, в котором иссечение пириформной доли мозга, включающей миндалевидный комплекс, осуществляют специальным резцом, выполненным в форме эллиптического параболоида. При этом угол иссечения устанавливают от 18-22 градусов к продольной оси мозга.

Недостатком этого способа является невозможность одномоментной дифференциации иссекаемого миндалевидного комплекса на кортикомедиальный и базолатеральный отделы.

Техническим результатом изобретения является полное выделение структур пириформной доли мозга с одномоментной дифференциацией их на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса.

Технический результат достигается тем, что при приготовлении переживающих срезов пириформной доли мозга путем иссечения ткани по форме эллиптического параболоида под углом от 18 до 22 градусов к продольной оси мозга с последующей инкубацией в питательной среде иссечение производят с одномоментной дифференциацией пириформной доли мозга на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса.

Способ позволяет получить пириформную долю мозга с одномоментной дифференциацией ее на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса с сохраненными нейрональными связями.

На чертеже представлен резец с емкостью и иллюстрация техники иссечения пириформной доли мозга.

Способ осуществляется следующим образом.

Пириформная доля мозга включает в себя как часть миндалевидный комплекс, представляющий собой совокупность поверхностно расположенных структур обонятельной коры и глубинно расположенных ядер. В состав миндалевидного комплекса входит два функционально различных отдела - кортикомедиальный 1 и базолатеральный 2.

Для дифференцированного выделения кортикомедиального 1 и базолатерального 2 отделов миндалевидного комплекса в составе пириформной доли предложен резец 3 с емкостью 4 в форме объемного образования - эллиптического параболоида, в полости которого находится центральная режущая часть 5, позволяющая получить пириформную долю, разделенную на две основные составляющие части - кортикомедиальный 1 и базолатеральный 2 отделы миндалевидного комплекса.

После декапитации и извлечения мозга из черепа его располагают базальной поверхностью кверху. Резцом 3 из пириформной доли мозга иссекают кусочек ткани, имеющий форму эллиптического параболоида. Иссечение проводят под углом 18-22° (оптимально 20°) к продольной оси мозга. Результатом иссечения является получение двух неравных по величине кусочков ткани, при этом меньший по величине, иссеченный из медиальной части полушария конечного мозга, представляет собой кортикомедиальный отдел 1 миндалевидного комплекса, а другой - базолатеральный отдел 2 миндалевидного комплекса.

Иссеченные кусочки ткани помещают основанием на столик, имеющий охлаждение, и разделяют с помощью вибратома на срезы, толщина которых варьируется в пределах 220-350 мкм.

Полученные срезы переносят в первую порцию инкубационной среды, в которой выдерживают 30 мин (преинкубация). В качестве инкубационной среды используют бикарбонатную среду Кребса-Рингера, в состав которой входят следующие компоненты, ммоль л-1: NaCl 118; KCl 4,7; CaCl2 2,5; KHPO4 1,2; MgSO4 1,2; NaHCO3 25; глюкоза 10. Инкубационную среду при комнатной температуре насыщают газовой смесью, содержащей 95% O2 и 5% СО2, с момента извлечения мозга из черепа до перемещения срезов в инкубационную среду должно пройти не более 5 мин.

Нейрофизиологические исследования проводят на срезах, которые после преинкубации помещают в свежую порцию инкубационной среды («рабочая порция»). Фиксацию срезов (устранение их смещения при перемещении инкубационной среды) обеспечивают с помощью помещения их между двумя нейлоновыми сеточками. Для исследования срезов используют комплекс устройств и приборов, предназначенных как для обеспечения длительного переживания срезов, так и регистрации электрической активности компонентов нервной ткани. Под контролем микроскопа к различным структурам миндалевидного комплекса вводят стеклянные микроэлектроды с диаметром кончика до 10-20 мкм. Регистрируют вне- и внутриклеточную активность и фокальные потенциалы в структурах палеокортекса (периамигдалярная кора, ядро латерального обонятельного тракта) и ряда ядер миндалевидного комплекса (базомедиальное, медиальное, кортикальное, базолатеральное). Полученные результаты характеризуют электрофизиологические ответы различных структур, а также их своеобразие, обусловленное взаимодействием различных образований миндалевидного комплекса, сохраняющих целостность и комплексность в составе срезов.

Морфологический контроль эффективности иссечения пириформной доли мозга и констатацию топографии введенного микроэлектрода осуществляют после завершения регистрации электрофизиологических ответов путем окрашивания срезов гистологическими методами (крезилом фиолетовым и гематоксилином-эозином).

Изучение микропрепаратов показало, что способ, реализуемый с помощью специального резца, обеспечивает полное выделение пириформной доли мозга с одномоментной дифференциацией ее на кортикомедиальный 1 и базолатеральный 2 отделы миндалевидного комплекса, а иссекаемые кусочки и срезы этого образования мозга полностью сохраняют свою структурную организацию.

Способ позволяет выделить полностью пириформную долю с миндалевидным комплексом с дифференциацией его на кортикомедиальный и базолатеральный отделы с сохраненными нейрональными связями и использовать переживающие срезы в нейробиологических исследованиях.

Формула изобретения

Способ приготовления переживающих срезов пириформной доли мозга путем иссечения ткани по форме эллиптического параболоида под углом от 18 до 22° к продольной оси мозга с последующей инкубацией в питательной среде, отличающийся тем, что при иссечении производят одномоментную дифференциацию пириформной доли мозга на кортикомедиальный и базолатеральный отделы миндалевидного комплекса.

Комментарии

Изобретение "СПОСОБ ПРИГОТОВЛЕНИЯ ПЕРЕЖИВАЮЩИХ СРЕЗОВ ПИРИФОРМНОЙ ДОЛИ МОЗГА" (Ахмадеев А.В., Калимуллина Л.Б.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
ЛЕОНАРДО да ВИНЧИ (Leonardo da Vinci) С УДОСТОВЕРЕНИЕМ ЛАУРЕАТА