КОМБИНИРОВАННЫЙ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ

Название	КОМБИНИРОВАННЫЙ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ
Разработчик (Авторы)	Давыдкин В.Ю., Давыдкин И.Ю., Мелихова А.В., Трофимова Л.И.
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2502509
Дата регистрации	22.11.2012
Правообладатель	Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека

Описание изобретения

Изобретение относится к медицине и биотехнологии и касается антибактериального средства для лечения желудочно-кишечных заболеваний, преимущественно острых кишечных инфекций, в том числе неустановленной этиологии.

Одним из иммунобиологических действующих веществ, перспективных с целью создания комбинированных препаратов, является комплексный иммуноглобулиновый препарат, разработанный в МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского. Материалом для его получения служит донорская плазма от большого количества доноров, поэтому имеет место коллективный иммунитет. Комплексный иммуноглобулиновый препарат, в отличие от нормального иммуноглобулина человека, содержит иммуноглобулины классов IgG, IgA, IgM, содержание которых может изменяться в зависимости от направленности действия препарата. Данный препарат характеризуется повышенным содержанием антител к энтеробактериям (шигеллам, сальмонеллам, эшерихиям, протею, клебсиеллам и др.), стафилококкам, а также к ротавирусам. Специфические антитела комплексного иммуноглобулинового препарата нейтрализуют действие энтеропатогенных микроорганизмов, что достигается за счет антител одинаковой специфичности, но разных классов, способствующих агглютинации, нейтрализации и преципитации инфекционных агентов.

При пероральном введении иммуноглобулины практически не расщепляются в желудке и двенадцатиперстной кишке, а только в малой доле распадаются на активные составляющие - Fc- и F(ab)'₂ - фрагменты, сохраняющие активность иммуноглобулинов. Комплекс действует на протяжении всего желудочно-кишечного тракта, но особенно в толстом кишечнике, где сосредоточено большое количество лимфоидной ткани (пейеровы бляшки).

Известно, что основными носителями иммунологической памяти являются иммуноглобулины класса G, имеющие самую простую среди антител структуру и самое массовое содержание в сыворотке любого человека. Специфические моноклональные иммуноглобулины образуются в лимфоидной ткани, их синтезируют лимфоциты, прошедшие дифференцировку за счет сенсибилизированных антигеном антител. Несмотря на короткий срок жизни иммуноглобулинов класса G (21-28 дней), за счет дифференцировки лимфоцитов иммунологическая память сохраняется достаточно долго. Молекулы иммуноглобулинов у всех людей имеют сходную структуру, поэтому не воспринимаются иммунной системой как чужеродные белки. Таким образом, введенные в организм «чужие» антитела, достигнув лимфоидной ткани кишечника, включаются в формирование иммунологической памяти наряду с собственными, вырабатываемыми в результате контакта с антигеном. Феномен рециркуляции лимфоцитов способствует образованию специфических антител в участках слизистой оболочки, отдаленных от очага первичной сенсибилизации. Таким образом, иммуноглобулины, введенные энтерально, не только выполняют функцию иммунного ответа в кишечнике, но и выступают в роли матрицы, с которой клонируются плазматические клетки с заданными свойствами. Система местного иммунитета кишечника приобретает способность противостоять тем микроорганизмам, антитела к которым содержатся в комплексе иммуноглобулинов.

Со времени создания препарата неоднократно показана его эффективность в лечении острых кишечных инфекций (ОКИ), в том числе неустановленной этиологии, причем не только у людей, но и у приматов (Оценка терапевтической эффективности биопрепаратов в капсулах в доклинических испытаниях на обезьянах / Лапин Б.А., Давыдкин В.Ю., Афанасьев С.С., Джикидзе Э.К., Мелихова А.В., Кебу Т.И., Егорова Т.П., Давыдкин И.Ю., Холодилова Л.И., Ардашелия С.Н. // Материалы второй международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные аспекты медицинской приматологии» 8-10 августа 2011 г, Сочи-Адлер. - С: Изд-во ООО ″СТЕРХ″, 2011. - Т.1. - с.172-179).

Наиболее подходящим из семейства антибиотиков для комбинированных препаратов против ОКИ, на наш взгляд, является офлоксацин. Этот антибиотик из семейства фторхинолонов имеет широкий спектр действия, влияет преимущественно на грамотрицательные и некоторые грамположительные микроорганизмы. Эффективен в отношении микроорганизмов, устойчивых к большинству антибиотиков и сульфаниламидных препаратов. Ингибирует ДНК-гиразу, нарушает процесс суперспирализации и сшивки разрывов ДНК, угнетает деление клеток, вызывает структурные изменения цитоплазмы и гибель микроорганизмов. Одним из преимуществ офлоксацина является его полное всасывание из желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). Следующее преимущество - его абсолютная биодоступность (Регистр лекарственных средств России РЛС Энциклопедия лекарств. - 14 вып. / Гл. ред. Г.Л. Вышковский. - М.: РЛС-2006, 2005. - с.610). Не менее важным является и то, что фторхинолоны в силу своей специфичности не оказывают угнетающего действия на бифидофлору человека, так как при развитии ОКИ почти всегда наблюдается гибель бифидобактерий в результате воздействия патогенных агентов. Указанное значительно снижает риск развития дисбактериоза в результате использования офлоксацина для лечения заболеваний. Единственным недостатком этого антибиотика является возможность его применения у людей только с 18 лет. Но возможно, что в экстремальных ситуациях это противопоказание не будет приниматься во внимание. В приматологии (НИИ медицинской приматологии РАМН, Сочи-Адлер, Россия) этот антибиотик успешно применяется в качестве лечебного средства при ОКИ (Доклинические испытания комплексного препарата КИП и В. adolescentis МС-42 / Давыдкин В.Ю., Джикидзе Э.К., Мелихова А.В., Кебу Т.И., Давыдкин И.Ю., Холодилова Л.И. // Мат. юбил. Всеросс. науч.-практич. конф. ″Научное обеспечение противоэпидемической защиты населения″, посвящ. 90-летию Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. академика И.Н. Блохиной Роспотребнадзора и 20-летию Приволжского окружного центра по проф. и борьбе со СПИД. - Н.Новгород: Издатель Гладкова, 2009. - с.334-337).

Известен способ лечения кишечных инфекций у детей, включающий введение средств, воздействующих на уровень облигатных микроорганизмов и корригирующих дефицит сывороточного кальция, в качестве которого используют препарат, представляющий собой порошок - смесь лиофилизированной микробной массы живых бифидобактерий, адсорбированных на частицах активированного угля и глюконата кальция, помещенную в герметичный пакетик, где содержится не менее 5×10⁷ КОЕ бифидобактерий, иммобилизованных на сорбенте, 0,5-1 г глюконата кальция и 0,10-0,12 г лактозы (RU, патент 2227036 С2, А61К 33/06, 35/74, 20.04.2004).

Недостатком известного способа является недостаточная антимикробная активность применяемого средства.

Известен комплексный бактериальный препарат энтерацид П, содержащий новый штамм Lactobacillus acidophilus ВКПМ В-6535 (140-160 млн живых клеток/г препарата) и штамм Enterococcus faecium ВКПМ В-2990 (190-210 млн живых клеток/г препарата), обладающий более высокой антагонистической активностью по отношению к некоторым микроорганизмам и характеризующийся хорошей приживаемостью входящих в него бактерий в желудочно-кишечном тракте пушных зверей и собак (RU, патент 2091075 C1, А61К 35/74, C12N 1/20, 27.09.1997).

Недостатком известного комплексного бактериального препарата является то, что он предназначен для лечения желудочно-кишечных заболеваний только животных, но не человека.

Известно средство, обладающее антибактериальной активностью, содержащее живую культуру ацидофильных лактобактерий в сочетании с комплексом сывороточных иммуноглобулинов, взятых в одинаковых весовых частях, при концентрации жизнеспособных микробных клеток 10⁷-10⁸ на массу 0,1 г и процентном соотношении компонентов в комплексе иммуноглобулина G:M:A, равном (55-60):(20-25):(15-20) (RU, патент 1779377 A1, А61К 35/74, 39/395, 07.12.1992).

Недостатком известного средства является недостаточно широкий спектр антибактериальной активности, обеспечиваемый входящими в него противомикробными действующими веществами.

Известен уникальный комбинированный антибактериальный препарат ВАМПИЛОКС_® (прототип), продвигаемый на украинском рынке компанией «Vaishali Pharmaceuticals)) и сочетающий в себе свойства антибиотика и пробиотика, содержащий в качестве антибиотика амоксициллин и клоксациллин, а в качестве пробиотика включающий споры Lactobacillus sporogenes, применяемый в амбулаторно-поликлинических и стационарных условиях для эмпирической терапии полимикробных, смешанных инфекций, а также для лечения доказанной или предполагаемой стафилококковой инфекции ().

Недостатком уникального комбинированного антибактериального препарата ВАМПИЛОКС_® является то, что рекомендовано его применение для лечения только известных кишечных инфекций (брюшной тиф, сальмонеллез), то есть в отношении ОКИ он является препаратом узконаправленного действия, что не позволяет его использовать для лечения острых кишечных инфекций неустановленной этиологии.

В основу изобретения положена задача создания комбинированного антибактериального препарата для лечения острых кишечных инфекций, обеспечивающего сокращение сроков лечения.

Задача решена тем, что смесь содержит из антибиотиков офлоксацин и из биологических компонентов комплекс иммуноглобулинов IgG(56-60):IgA(16-22):IgM(22-24) при следующем соотношении, мг/флакон: офлоксацин - 250, комплекс иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM - 300.

Достигаемый технический результат по созданию комбинированного препарата для лечения ОКИ, представляющего собой смесь офлоксацина и комплекса иммуноглобулинов заключается в значительном сокращении сроков заболевания приматов острой кишечной инфекцией. Выздоровление животных происходит в среднем в 1,8 раза быстрее, чем при лечении антибиотиком офлоксацином в дозе 200 мг.

Заявляемый комбинированный антибактериальный препарат для лечения острых кишечных инфекций, является новым и в литературе не описан.

Заявляемый препарат представляет собой смесь для приготовления суспензии в мелкой фармацевтической таре (например, флаконах) объемом 10 мл, содержащей 250 мг субстанции офлоксацина и 300 мг сухой измельченной биомассы комплекса иммуноглобулинов IgG:IgM:IgA.

Способ получения предлагаемого комбинированного препарата заключается в следующем.

Комплекс иммуноглобулинов получали в соответствии с патентом RU 2371200, А61К 39/395, С07К 16/06, 27.10.2009. Сублимированную биомассу иммуноглобулинов измельчали в роторной мельнице или электромагнитном аппарате до наибольших значений максимальной насыпной плотности измельченной биомассы, как описано в работе (Давыдкин И.Ю., Давыдкин В.Ю., Мелихова А.В. Рациональный подход к измельчению // Мат. юбил. Всеросс. науч.-практич. конф. ″Научное обеспечение противоэпидемической защиты населения″, посвящ. 90-летию Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. академика И.Н. Блохиной Роспотребнадзора и 20-летию Приволжского окружного центра по проф. и борьбе со СПИД. - Н.Новгород: Издатель Гладкова, 2009. - с.344-347). Соотношение в ней фракций IgG:IgM:IgA составляло соответственно (56-60):(16-22):(21-24), а специфическая антисальмонеллезная активность - 1:320 в титрах РПГА.

Субстанцию офлоксацина (производитель NANJING FOREIGN ECONOMIC & TRADE DEVELOPMENT CO., LTD, CHINA) измельчению не подвергали. Содержание действующего вещества в субстанции составляло 99,4%.

Измельченную биомассу иммуноглобулинов и субстанцию офлоксацина смешивали в аппарате периодического действия СМ-30 в заданном соотношении и готовую смесь фасовали во флаконы ФО-1-10 таким образом, чтобы каждый флакон содержал 250 мг офлоксацина и 300 мг измельченной биомассы иммуноглобулинов.

Доклиническое изучение терапевтической эффективности заявленного комбинированного препарата в суспензии при лечении острых кишечных инфекций у обезьян осуществляли на базе ГУ НИИ медицинской приматологии РАМН (г.Сочи-Адлер).

Испытания разработанного препарата проведены на обезьянах вида макака резус обоего пола разного возраста (1,3-18,3 лет) весом 2,5-10,0 кг, спонтанно болеющих ОКИ с выраженным диарейным синдромом. Диарейный синдром - частый жидкий стул со зловонным запахом без патологической примеси от 6 до 8 раз в сутки, умеренная сниженная активность.

Всех животных вылавливали из групповых клеток и вольер и размещали в индивидуальных. Животных сравниваемых групп подбирали методом свободной выборки, которые были репрезентативны по возрасту, весу и полу. Животных содержали на брикетированных кормах, изготовляемых на брикетировочном заводе ГУ НИИ медицинской приматологии РАМН по рецептуре, разработанной фирмой ″Альтрогге″ для приматов.

Каждая обезьяна получала по одному флакону заявленного препарата в сутки. Суспензию готовили непосредственно перед дачей препарата обезьянам. Срок лечения составлял 7 дней. Срок наблюдения - 14 суток. В качестве препарата сравнения использовали таблетки офлоксацина 200 мг в дозе 1 таблетка на 1 обезьяну в сутки.

Результаты проведенных исследований, представляющие собой сравнение средней длительности в днях исчезновения клинических проявлений заболевания у приматов, представлены в таблице.

Как следует из анализа данных, представленных в таблице, комбинированный препарат, представляющий собой сухую смесь для приготовления суспензии и содержащий 250 мг офлоксацина и 300 мг измельченной биомассы иммуноглобулинов, обеспечивает значительное сокращение (в 1,8 раза) длительности клинических проявлений заболевания у приматов по сравнению с известным препаратом офлокасацин в таблетках по 200 мг, а значит и соответствующее сокращение сроков лечения обезьян от острой кишечной инфекции.

Формула изобретения

1. Комбинированный антибактериальный препарат для лечения острых кишечных инфекций, представляющий собой смесь антибиотика и биологического компонента, отличающийся тем, что в качестве антибиотика смесь содержит офлоксацин, а в качестве биологического компонента комплекс иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM при следующем соотношении, мг/флакон:
офлоксацин - 250 мг,
комплекс иммуноглобулинов IgG, IgA, IgM - 300 мг.

2. Комбинированный антибактериальный препарат для лечения острых кишечных инфекций по п.1, отличающийся тем, что процентное соотношение иммуноглобулиновых фракций IgG:IgA:IgM составляет 56-60:16-22:22-24 соответственно.

Изобретение "КОМБИНИРОВАННЫЙ АНТИБАКТЕРИАЛЬНЫЙ ПРЕПАРАТ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ" (Давыдкин В.Ю., Давыдкин И.Ю., Мелихова А.В., Трофимова Л.И.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога