ШТАММ В/60/ПЕТЕРБУРГ/95/20 ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЕТЕЙ

Название	ШТАММ В/60/ПЕТЕРБУРГ/95/20 ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЕТЕЙ
Разработчик (Авторы)	Киселева И.В., Ларионова Н.В., Александрова Г.И., Руденко Л.Г.
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2128224
Дата регистрации	27.03.1999
Правообладатель	Научно-исследовательский институт экспериментальной медицины РАМН
Медаль имени А.Нобеля

Описание изобретения

Изобретение относится к медицинской вирусологии и может быть использовано в здравоохранении для профилактики эпидемического гриппа среди взрослых и детей живой интраназальной гриппозной вакциной из штамма B/60/Петербург/95/20. Известный вакцинный штамм B/60/32/P вируса гриппа B - прототип [1] - утратил антигенную актуальность и вследствие этого не может вызывать защитную реакцию во время эпидемии, вызванной современными штаммами вируса гриппа B.

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение, является получение вакцинного штамма актуальной антигенной разновидности на основе эпидемического вируса B/Петербург/92/95.

Вакцинный штамм B/60/Петербург/95/20 получен методом генетической реассортации эпидемического вируса B/Петербург/92/95 с холодоадаптированным штаммом B/СССР/60/69 - донором аттенуации - с последующей селекцией в присутствии антисыворотки к вирусу B/СССР/60/69. Донор аттенуации В/СССР/60/69 - холодоадаптированный температурочувствительный штамм вируса гриппа, разрешенный для получения безвредных живых интраназальных вакцин для взрослых и детей [2].

Методом сравнительного анализа электрофоретической подвижности фрагментов РНК родительских вирусов и реассортантных клонов в полиакриламидных гелях установлено, что вакцинный штамм B/60/Петербург/95/20 унаследовал 6 генов, кодирующих внутренние белки (PB1, PB2, PA, NP, М, NS) от донора аттенуации, и 2 гена, кодирующих поверхностные белки - HA (гемагглютинин) и NA (нейраминидазу) - от эпидемического вируса. Штамм является температурочувствительным (разность титров при 33^oC и 39^oC - 6.0 lg ЭИД₅₀/0,2 мл) и холодоадаптированным (разность титров при 33^oC и 25^oC - 4,0 lg ЭИД₅₀/0,2 мл).

Таким образом, представленный вакцинный штамм B/60/Петербург/95/20 характеризуется сочетанием полезных признаков, необходимых вакцинному штамму - антигенной специфичностью поверхностных белков эпидемического вируса B/Петербург/92/95, структурой генома, оптимальной для реассортантных вакцинных штаммов, температурочувствительностью и холодоадаптированностью, что коррелирует с аттенуацией для человека, характерной для донора аттенуации.

Морфология штамма - полиморфная, типичная для вируса гриппа.

ХАРАКТЕРИСТИКА ШТАММА
Инфекционная активность при репродукции в развивающихся куриных эмбрионах при 33^oC в течение 72 часов - 7,5 lg ЭИД₅₀/0,2 мл.

Гемагглютинирующая активность -1:256.

Штамм проявляет генетическую стабильность биологических признаков после 5 пассажей на куриных эмбрионах (при использовании больших заражающих доз).

Данные из паспорта на вакцинный штамм B/60/Петербург/95/20 приведены ниже.

1. Название штамма - B/60/Петербург/95/20
2. Серия - серия 1
3. Метод получения и характеристика родительских вирусов при представлении рекомбинантного штамма: рекомбинация
а). эпидемический вирус - B/Петербург/92/95
б). донор аттенуации - B/СССР/60/69
4. Количество пассажей - 7 в процессе рекомбинации
5. Характеристика штамма:
а). оптимальные условия репродукции - 33^oC, 72 часа;
б). гемагглютинирующая активность - 1:256;
в). инфекционная активность - 7.5 lg ЭИД₅₀/0,2 мл;
г). чувствительность к ингибиторам - ингибиторочувствительный;
д). разность в показателях инфекционной активности при 33^oC и 39^oC - 6.0 lg ЭИД₅₀/0,2 мл:
е). разность в показателях инфекционной активности при 33^oC и 25^oC - 4.0 lg ЭИД₅₀/0,2 мл.

ж). структура генома рекомбинанта:
- гены от эпидемического вируса- НА, NA
- гены от донора аттенуации - РА, РВ1, РВ2, NP, М, NS
6. Характеристика штамма после лиофилизации:
а). дата лиофилизации - 8 июля 1996 года:
б). объем материала в ампуле - 1 мл;
в). количество доз в серии - 3;
г). инфекционная активность - 7.0 lg ЭИД₅₀/0.2 мл;
д). гемагглютинирующая активность -1:128.

7. Рекомендуемое разведение при вакцинации - 1:3.

8. Антигенная специфичность
а). гемагглютинина в РТГА - идентичен вирусу В/Петербург/92/95, антисывороткой к которому полностью нейтрализуется;
б). нейраминидазы - идентична вирусу В/Петербург/92/95 по данным электрофореза в полиакриламидном геле.

9. Безвредность для мышей при подкожном введении - безвреден.

10. Бактериологический контроль лиофилизированного материала: дата проведения - 26 июля 1996 года
результат - стерилен.

11. Контроль на отсутствие посторонних вирусов - посторонние вирусы отсутствуют.

1. Штамм B/60/Петербург/95/20 ареактогенен и иммуногенен для взрослого контингента.

Таким образом, вакцинный штамм B/60/Петербург/95/20 по показателям реактогенности соответствует требованиям, предъявляемым к вакцинным штаммам фармакопейной статьей ФС 42-298 ВС-89 на живую гриппозную вакцину для интраназального применения детям 3-14 лет.

Формула изобретения

Штамм вируса гриппа И/60/Петербург/95/20 ГИСК N 1003 (Государственный институт стандартизации и контроля им.Л.А.Тарасевича), используемый для получения живой гриппозной интраназальной вакцины для взрослых и детей.

Изобретение "ШТАММ В/60/ПЕТЕРБУРГ/95/20 ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ЖИВОЙ ГРИППОЗНОЙ ИНТРАНАЗАЛЬНОЙ ВАКЦИНЫ ДЛЯ ВЗРОСЛЫХ И ДЕТЕЙ" (Киселева И.В., Ларионова Н.В., Александрова Г.И., Руденко Л.Г.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога