L международная выставка-презентация
научных, технических, учебно-методических и литературно-художественных изданий
ПРОТИВОИШЕМИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО
| Название | ПРОТИВОИШЕМИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО |
|---|---|
| Разработчик (Авторы) | Плотников Марк Борисович, Чернышева Галина Анатольевна, Смольякова Вера Ивановна, Щетинин Пётр Павлович, Плотникова Татьяна Макаровна, Кучин Александр Васильевич, Чукичева Ирина Юрьевна |
| Вид объекта патентного права | Изобретение |
| Регистрационный номер | 2499593 |
| Дата регистрации | 24.10.2012 |
| Правообладатель | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский институт фармакологии" Сибирского отделения Российской академии медицинских наук (ФГБУ "НИИ фармакологии" СО РАМН) |
| Область применения (класс МПК) | A61K 31/05 (2006.01) A61K 31/015 (2006.01) A61P 9/10 (2006.01) |
Описание изобретения
Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается применения 4-метил-2,6-диизоборнилфенола в качестве лекарственного средства, обладающего противоишемическими свойствами с высокой степенью активности. 3 табл., 2 пр.
Изобретение относится к медицине, конкретно к фармакологии, и касается средства, обладающего противоишемическими свойствами.
Известны средства, проявляющие противоишемические свойства: триметазидин [1,2], милдронат [2, 3], эмоксипин [4], мексидол [5], n-тирозол [6, 7, 8, 9, 10] и другие средства [4, 11, 12, 13, 14, 15].
Задачей изобретения является расширение номенклатуры противоишемических средств.
Поставленная задача достигается использованием 4-метил-2,6-диизоборнилфенола в качестве противоишемического средства.
Известно, что 4-метил-2,6-диизоборнилфенол обладает антиоксидантной [16], гемореологической, антитромбоцитарной, антитромбогенной [17, 18, 19, 20, 21, 22], эндотелийпротекторной [23], нейропротекторной [24, 25, 26], ретинопротекторной [27] активностью и способен увеличивать мозговой кровоток [28]. При этом показана низкая токсичность соединения [29].
Использование 4-метил-2,6-диизоборнилфенола, как противоишемического средства при инфаркте миокарда, стенокардии, «синдроме реперфузии», хронической сердечной недостаточности, в литературе не описано.
Принципиально новым в предлагаемом изобретении является то, что в качестве противоишемического средства используется 4-метил-2,6-диизоборнилфенола. 4-метил-2,6-диизоборнилфенол может применяться для первичной и вторичной профилактиктики ишемических повреждений миокарда. Данное свойство явным образом не вытекает для специалиста из уровня техники.
Таким образом, данное техническое решение соответствует критериям изобретения «Новизна», «Изобретательский уровень» и «Промышленная применимость».
Объектом исследования являлись аутбредные крысы-самцы сток Вистар.
Эксперименты по изучению противоишемической активности 4-метил-2,6-диизоборнилфенола были выполнены на 49 аутбредной крысе-самце сток Вистар массой 220-240 г.
Животные были разделены на 2 группы: крысы контрольной группы (n=33) получали 1 мл 2% крахмальной слизи в течение 3 суток до и 5 суток после создания модели острой ишемии миокарда с реперфузией, крысы опытной группы (n=16) получали 1 мл взвеси 4-метил-2,6-диизоборнилфенол в 2% крахмальной слизи в дозе 100 мг/кг в течение 3 суток до и 5 суток после создания модели острой ишемии миокарда с реперфузией. Крахмальную слизь и исследуемое вещество в виде суспензии в крахмальной слизи вводили внутрижелудочно один раз в сутки.
4-Метил-2,6-диизоборнилфенола исследовали с помощью электрокардиографического (ЭКГ) и морфологического методов. ЭКГ регистрировали на 1, 3 и 5 сутки эксперимента с помощью компьютерного электрокардиографа Поли-Спектр-8/Л (Россия).
Для моделирования ишемии миокарда с реперфузией крыс наркотизировали тиопентал-натрием (60 мг/кг), интубировали и подключали к аппарату искусственной вентиляции легких (ИВЛ) Rodent Ventilator 7025 (Италия). После проведения торако- и перикардотомии проводили окклюзию левой коронарной артерии на уровне нижнего края auricula sinistra без нарушения топографии сердца в грудной клетке по методу А.Х. Когана [30]. Длительность окклюзии левой коронарной артерии составляла 40 мин, после чего лигатуру развязывали и проводили реперфузию. Для верификации окклюзии коронарной артерии проводили мониторирование ЭКГ во II стандартном отведении, используя компьютерный электрокардиограф Поли-Спектр-8/Л (Россия). У ложнооперированных животных проводили аналогичное оперативное вмешательство без наложения лигатур на левую коронарную артерию.
На 5-е сутки после реперфузии крыс вновь наркотизировали (тиопентал-натрий 60 мг/кг внутрибрюшинно), подключали ИВЛ и затягивали лигатуру. Для выявления зоны гипоперфузии в бедренную вену болюсно вводили 0,2 мл 5% раствора красителя patent blue violet («Sigma») и через 10-20 с извлекали сердце. Участки миокарда с сохраненной перфузией окрашивались в зеленый цвет, неперфузируемые оставались неокрашенными.
Поперечные срезы сердца толщиной 300 мкм приготавливали на замораживающем микротоме МЗ-2 (Россия). Полученные срезы (39-42 в зависимости от размеров сердца) распределяли по 4 предметным стеклам, размещая на каждое по одному из четырех смежных срезов. Срезы на 2 стеклах оставляли в нативном виде (для оценки зоны гипоперфузии), срезы на двух других стеклах окрашивали нитросиним тетразолием (НСТ) («Sigma») по Зелигману и Рутенбергу [31] для выявления в ткани дегидрогеназной активности. Срезы заключали в глицериново-желатиновый гель и сканировали. Оценку размера зон гипоперфузии и изменения дегидрогеназной активности проводили с использованием программы Adobe Photoshop CS2.
За зону инфаркта принимали зоны с резким снижением дегидрогеназной активности. Для этого на срезах миокарда выделяли участки, суммарная интенсивность окраски которых была снижена в 2,5 раза и более относительно интактных областей миокарда, что отражает топографию снижения в той же степени дегидрогеназной активности [30].
ЭКГ-мониторинг проводили на 1-е, 3-й и 5-е сутки реперфузии.
Статистическую обработку результатов проводили стандартными методами с применением t-критерия Стъюдента и критерия χ2 с помощью пакета программ «Statistica for Windows 6.0».
Результаты исследований представлены в примерах 1 и 2.
Пример 1.
В контрольной группе в течение первых 2-3 часов после восстановления кровоснабжения миокарда левого желудочка погибло 16 животных из 33 (48%) (табл.1).
| Таблица 1. | ||
| Влияние курсового внутрижелудочного введения 4-метил-2,6-диизоборнилфенола (100 мг/кг) на выживаемость животных в течение первых суток после ишемии/реперфузии миокарда | ||
| Группа | Общее количество | Выжившие (%) |
| Контроль | 33 | 17(52%) |
| 4-Метил-2,6-диизоборнил фенол | 16 | 13 (81%)+ |
| Примечание: + - р<0,05 по сравнению со значениями в контрольной группе | ||
В контрольной группе у крыс к 1-м суткам и в течение последующих 5 суток после возобновления перфузии миокарда левого желудочка на ЭКГ наблюдалось появление патологического зубца Q, свидетельствующего о наличии некротических изменений в миокарде [32], и снижение амплитуды зубца Т относительно исходных значений. В течение 1-5 суток после восстановления кровоснабжения миокарда в контрольной группе сохранялось существенное снижение амплитуды зубца R относительно исходных значений, характеризующее нарушение процесса деполяризации желудочков вследствие выключения части миокарда из процессов возбуждения [32] (табл.2).
Зона гипоперфузии в контрольной группе занимала 32,8±0,5%. Зона резко сниженой дегидрогеназной активности составила в среднем 19,0±0,8% от общей площади срезов миокарда и занимала 57,9±2,4% от площади зоны гипоперфузии (табл.3).
| Таблица 2. | ||||
| Влияние курсового внутрижелудочного введения 4-метил-2,6-диизоборнилфенола (100 мг/кг) на параметры ЭКГ крыс на 1-е, 3-й и 5-е сутки после ишемии/реперфузии миокарда | ||||
| Показатель | Исходные значения | 1-е сут | 3-й сут | 5-е сут |
| Контроль(n=17) | ||||
| ЧСС, мин-1 | 439±±15 | 441±15 | 431±12 | 420±12 |
| PQ, мс | 42,1±06 | 44,0±1,0 | 44,2±1,5 | 41,8±1,5 |
| QT, мс | 82,5±1,8 | 80,6±2,0 | 78,6±2,3 | 81,6±2,1 |
| Q, мкВ | 0±0 | 28,6±2,9# | 20,9±2,3# | 7,6±1,4# |
| R, мкВ | 310,2±14,7 | 174,1±14,2# | 186,3±8,9# | 228,3±12,3# |
| Т, мкВ | 243,8±19,1 | 17,7±1,3# | 19,7±3,0# | 75,4±7,8# |
| 4-Метил-2,6-диизоборнилфенол (n=13) | ||||
| ЧСС, мин-1 | 439±11 | 441±13 | 419±12 | 439±11 |
| PQ, мс | 37,8±2,4 | 44,2±1,0 | 42,5±2,3 | 39,6±1,9 |
| QT, мс | 81,5±1,4 | 78,9±4,1 | 77,5±2,1 | 79,2±1,7 |
| Q, мкВ | 0±0 | 25,7±2,4# | 15,6±1,8# | 4,5±1,6#+ |
| R, мкВ | 316,2±21,5 | 192,3±20# | 240±24,7#+ | 274,6±27,6 |
| Т, мкВ | 293,9±17,4 | 51,3±11,3#+ | 76,7±5,5#+ | 147,4±12,8#+ |
| Примечание: # - р<0,05 по сравнению с исходными значениями; | ||||
| + - р<0,05 по сравнению со значениям в контрольной группе | ||||
| Таблица 3. | |||
| Влияние курсового внутрижелудочного введения 4-метил-2,6-диизоборнилфенола (100 мг/кг) на размеры зоны гипоперфузии и зоны резко сниженной дегидрогеназной активности на 5-е сутки после ишемии/реперфузии миокарда | |||
| Зона | Зона резко сниженной | ||
| Группа | гипоперфузии, % | дегидрогеназной активности | |
| от площади | % от площади | % от площади | |
| миокарда | миокарда | гипоперфузии | |
| Контроль (n=12) | 33±1 | 19±1 | 58±2 |
| 4-Метил-2,6- | 32±2 | 10±1+ | 31±3+ |
| диизоборнилфенол (n=12) | |||
| Примечание: + - р<0,05 по сравнению со значениями в контрольной группе значениями в контрольной группе | |||
Пример 2. В опытной группе в период реперфузии из 16 животных погибло 3. Таким образом, смертность составила 19%, что достоверно отличалось от показателя в контрольной группе (табл.1).
В группе животных с введением 4-метил-2,6-диизоборнилфенола через 1 сутки после реперфузии миокарда амплитуда зубца Q на ЭКГ после эпизода ишемии/реперфузии в опытной группе была аналогична контрольным показателям. К 3-м суткам наблюдения отмечена отчетливая тенденция к снижению амплитуды зубца Q, а к 5-м суткам данный показатель достоверно отличался от контроля. Снижение амплитуды зубца Т было менее выраженным и достоверно отличалось от контроля на всем протяжении наблюдения. В опытной группе крыс к 3-м суткам выявлялось отчетливое повышение амплитуды зубца R относительно контрольной группы, снижение этого показателя относительно исходных значений сохранялось в течение первых трех суток (табл.2).
Зона гипоперфузии в группе животных, получавших 4-метил-2,6-диизоборнилфенол, занимала 32,1±1,9% от общей площади поперечных срезов миокард, что соответствовало показателю контрольной группы. Зона резко сниженной дегидрогеназной активности составила 10,0%±1,2% от общей площади миокарда и 31,2±3,1% от площади зона гипоперфузии (табл.3). Следовательно, лечебно-профилактическое введение 4-метил-2,6-диизоборнилфенола в дозе 100 мг/кг значимо уменьшало зону инфаркта как от общей площади миокарда (на 47%), так и от площади гипоперфузии (на 46%) по сравнению с аналогичными показателями контрольной группы.
Таким образом, 4-метил-2,6-диизоборнилфенол при лечебно-профилактическом введение в дозе 100 мг/кг снижает смертность животных в постреперфузионный период и уменьшает размеры зоны инфаркта как относительно общей площади миокарда, так и относительно зоны гипоперфузии.
Формула изобретения
Применение 4-метил-2,6-диизоборнилфенола в качестве противоишемического средства.
Медаль Альфреда Нобеля