РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИЙ ГЕЛЬ

Название	РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИЙ ГЕЛЬ
Разработчик (Авторы)	Ямсков Игорь Александрович, Ямскова Виктория Петровна, Шайхалиев Астемир Икрамович, Стрецкий Геннадий Михайлович, Ижбирдеев Эльдар Наильевич, Тихонов Владимир Евгеньевич, Рыбакова Елена Юрьевна, Галкин Олег Михайлович, Краснов Михаил Сергеевич
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2468814
Дата регистрации	15.04.2011
Правообладатель	Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова Российской академии наук (ИНЭОС РАН), Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова РАН (ИБР РАН)
Область применения (класс МПК)	A61K 38/14 (2006.01) A61K 31/19 (2006.01) A61K 31/722 (2006.01) A61K 35/16 (2006.01) A61P 17/02 (2006.01)
Медаль имени А.Нобеля

Описание изобретения

Изобретение относится к медицине и ветеринарии, а именно эмульсионным лечебно-профилактическим средствам наружного применения при кожных ранах (в том числе гнойных).

Актуальность разработки таких препаратов вызвана тем, что в настоящее время частота поражений кожи имеет тенденцию к росту. Проблема борьбы с раневыми дефектами крайне важна как для гражданской, так и для военно-полевой медицины. Развитие сложных промышленных производств, наличие на вооружении большинства армий зажигательных смесей, все возрастающее количество природных катаклизмов и техногенных катастроф требует повышение эффективности терапии раневых дефектов при большей доступности и оперативности применения лекарственных препаратов.

Раневые дефекты различной степени тяжести сопровождаются нарушением кислотно-щелочного равновесия и синтеза белков, совокупностью ферментных реакций распада сложных высокомолекулярных и биоорганических соединений, что приводит к некрозу тканей, экссудативным реакциям, образованию грануляционной ткани, бактериальной осемененности раневой поверхности.

В качестве ранозаживляющих препаратов в настоящее время используется большое количество лекарственных средств, среди которых особое место занимают препараты на основе неорганических и металлоорганических соединений, например следующие:

Известным ранозаживляющим препаратом является метилурацил, относящийся к классу пиримидинов и оказывающий влияние на восстановление разрушенных клеток и снижение воспалительных процессов. Для лечения применяется метилурациловая мазь на вазелино-ланолиновой основе. Однако такая основа препятствует нормальному газообмену, что снижает ранозаживляющую активность препарата, особенно при вялотекущих процессах и может вызвать аллергическую реакцию.

Наиболее эффективными являются ранозаживляющие средства, имеющие эмульсионную или гелеобразную консистенцию, так как они легко наносятся и впитываются.

Наиболее близким по технической сущности к заявленному средству является средство для наружного применения "Полимед" [Патент РФ №12140264, кл. А61К 31/00 (1999)], содержащее фенол медицинский, резорцин, борную кислоту, дистиллированную воду, хитозан, диметилсульфоксид, йодистый калий, уксусную кислоту ледяную, глицерин и анестетик при следующем соотношении компонентов, мас.%:

При раневых поражениях препарат может использоваться как средство доврачебной помощи, так как на поверхности пораженной кожи образует пленку, которая служит защитным покрытием. "Полимед" представляет собой устойчивый гель и может храниться при комнатной температуре в течение двух лет без потери фармакологической активности и физико-химических свойств.

К недостаткам прототипа следует отнести (i) наличие в его составе токсических и канцерогенных веществ, таких как фенол, борная кислота, диметилсульфоксид, которые могут вызывать аллергические реакции со стороны организма при попадании на кожу и оказывать токсическое действие при попадании в кровь. Кроме этого препарат (ii) недостаточно эффективен из-за отсутствия в его составе активного морфогенетического вещества.

Задачей настоящего изобретения является создание нового эффективного ранозаживляющего средства для наружного применения, обладающего широким спектром действия. В заявляемом средстве отсутствуют токсические компоненты. Кроме того, в его состав входит биорегулятор, выделенный из сыворотки крови, который стимулирует репаративные процессы, восстанавливая морфологически и биохимически нормальные структуры тканей. Указанный биорегулятор содержится в незначительном количестве, что практически сводит до нуля вероятность токсической или аллергической реакции на него со стороны организма.

Техническим результатом решения поставленной задачи является создание эффективного ранозаживляющего средства, которое представляет собой гель для наружного применения, и содержит в качестве активных ингредиентов хитозан, салициловую кислоту и биорегулятор животного происхождения при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Заявляемая композиция содержит следующие действующие компоненты.

Хитозан представляет собой катионный полимер, обычно получаемый из панцирей крабов, обладает бактериостатическими, ранозаживляющими и иммуностимулирующими свойствами, подавляет развитие фиброза, стимулирует макрофаги, способствует нормальному восстановлению кожного покрова. Образуя пленку на поверхности раны, он препятствует попаданию токсических компонентов, обладает хорошим осмотическим эффектом. Хитозан практически не токсичен для организма млекопитающих, его LD₅₀ находится на уровне LD₅₀ сахара и поваренной соли.

Салициловая кислота (о-оксибензойная кислота) - простейшая ароматическая оксикислота, которая представляет собой бесцветные кристаллы, плохо растворимые в воде и хорошо растворимые в органических растворителях; широко распространена в природе, главным образом в виде гликозида ее метилового эфира (метилсалицилата). В промышленности ее обычно получают карбоксилированием фенола. Салициловая кислота обладает слабыми антисептическими, раздражающими и кератолитическими (в больших концентрациях) свойствами. Применяют наружно в мазях, пастах, присыпках и растворах при лечении кожных заболеваний; натриевую соль салициловой кислоты (салицилат натрия), ее амид (салициламид) и ацетилсалициловую кислоту (аспирин) используют как жаропонижающие, противоревматические, противовоспалительные и болеутоляющие средства; благодаря антисептическому действию ее употребляют при консервировании пищевых продуктов. Салициловая кислота токсична в больших дозах, для человека предполагаемая LD₅₀ составляет 1.75 г/кг.

Биорегулятор из сыворотки крови крупного рогатого скота. Для его получения использовали сыворотку крови крупного рогатого скота - стерильный, инактивированный коммерческий препарат, используемый в качестве добавки в ростовую среду клеточных культур, производства ФГУП «Предприятие по производству бактерийных и вирусных препаратов Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М.П.Чумакова РАМН».

Выделение биорегулятора из сыворотки крови осуществляли путем высаливания в насыщенном растворе сернокислого аммония. Для этого к охлажденному раствору тканевого экстракта или сыворотки крови постепенно добавляли сухой сернокислый аммоний при постоянном перемешивании до образования насыщенного раствора соли (на 1000 мл раствора 780 г соли). Суспензию белков оставляли на 7 суток при температуре +4°С, после чего центрифугировали для осаждения примесных белков при 12000g в течение 30 минут с помощью центрифуги Т 32А Janetzki (Германия). Собирали фракцию супернатанта и осадка. Фракцию супернатанта диализовали против дистиллированной воды, а фракцию осадка - против физиологического раствора для удаления низкомолекулярных примесей и сульфата аммония в течение 14 дней. Присутствие в растворе ионов аммония определяли реакцией с реактивом Несслера. Полученные фракции супернатантов далее концентрировали, используя роторный вакуумный испаритель, при температуре +37°С. Фракции осадков хранили при температуре -70°С.

Изоэлектрофокусирование фракций супернатантов

Для проведения изоэлектрофокусирования (ИЭФ) приготавливали следующие растворы:

Тяжелый электродный раствор - 60% сахарозы, 1% Н₃РО₄.

Легкий электродный раствор - 0,1% NaOH.

Тяжелый градиентный раствор - 75 г сахарозы, до 200 мл дистиллированной воды.

Легкий градиентный раствор - 15 г сахарозы, до 200 мл дистиллированной воды.

Фракции супернатантов сыворотки крови и экстракта костной ткани (общим объемом 100 мл каждая) разделяли с помощью метода ИЭФ в градиенте плотности сахарозы на колонке LKB-440 («LKB», Швеция), используя амфолины диапазона рН 3,5-10,0 (Serva, Германия) (Остерман, 1983). В колонку наслаивали растворы в следующем порядке: тяжелый электродный раствор, тяжелый и легкий градиентные растворы, которые подавали из градиентного смесителя, легкий электродный раствор. Исследуемую фракцию (не более 100 мг белка) в виде раствора вводили в тяжелый градиентный раствор. ИЭФ проводили при +4°С в течение 96 часов при напряжении 500-1500 В. Собирали фракции объемом 10 мл. Детекцию белков осуществляли на спектрофотометре Ultrospec 1100 pro, (Biochrom Ltd., Великобритания) при 280 нм, для каждой фракции определяли значение рН с помощью рН-метра Oakton 2100 series (EUTECH Instruments, Сингапур). Согласно полученной картине разделения собирали фракцию кислых белков в интервале значений рН<3,0, которую далее длительно диализовали против дистиллированной воды и концентрировали. Данную фракцию далее разбавляли до соответствующей концентрации 10^-9-10^-11 мг белка/мл.

Существенным отличием заявляемого изобретения является то, что предлагаемое ранозаживляющее средство в форме геля содержит новый биорегулятор, выделенный из сыворотки крови крупного рогатого скота (КРС) в низких концентрациях, обладающий выраженным репарирующим действием, приводящим к восстановлению морфологически и биохимически нормальной ткани кожи.

Для приготовления заявляемого ранозаживляющего геля растворяют 10-30 г хитозана в 1 л воды в присутствии 3-5 г салициловой кислоты при 50°С. Раствор стерилизуют при 120°С в течение 5 мин, при этом образуется гель, который охлаждают, фильтруют, а затем в полученный гель добавляют 10 мл водного раствора биорегулятора из сыворотки крови КРС в концентрации 10^-9-10^-11 мг/мл. Тщательно перемешивают в течение 15-30 мин и получают готовый для использования гель. Указанные выше количества хитозана (от 10 до 30 г) выбраны потому, что при таком содержании хитозана получается гель с определенным размером пор, через которые наиболее эффективно происходит высвобождение биорегулятора на раневую поверхность.

Указанный выше интервал концентраций биорегулятора был выбран потому, что в диапазоне концентраций от 10^-9 до 10^-11 мг/мл биорегулятор обеспечивает максимальную заживляющую эффективность заявляемого средства.

При нанесении на поверхность раны тонкого слоя ранозаживляющего геля образуется пленка, проницаемая для воздуха, но при этом препятствующая проникновению и размножению микроорганизмов на раневой поверхности за счет бактерицидного и бактериостатического действия салициловой кислоты и хитозана, соответственно. На поверхность раны из образовавшейся пленки поступает также вышеописанный биорегулятор, который оказывает регуляторное морфогенетическое действие; за счет этого и достигается технический результат в виде эффективного ранозаживляющего действия и восстановления повреждения. Кроме того, в результате нанесения геля на поверхность раны существенно снижается болевой эффект.

Изобретение иллюстрируется нижеследующими примерами получения и примерами конкретных составов заявляемого ранозаживляющего геля, а также фигурами 1 и 2, иллюстрирующими ранозаживляющее действие предлагаемого средства.

ПОДПИСИ К ФИГУРАМ

Фиг.1. Заживление кожной раны у мыши на 8 сут: а - с добавлением гноя в рану; б - без добавления гноя в рану; в - с добавлением гноя и мази левомеколь; г - с добавлением гноя и биорегулятора из сыворотки крови в составе хитозанового геля.

Увеличение ок. 10, об × 10. Цифрами помечены: 1 - эпителий, 2 - дерма, 3 - подкожная жировая ткань, 4 - струп, 5 - протоки желез.

Фиг.2. Заживление кожной раны у мыши на 13 сут: а - с добавлением гноя в рану; б -без добавления гноя в рану; в - с добавлением гноя и мази левомеколь; г - с добавлением гноя и биорегулятора сыворотки крови в составе хитозанового геля. Увеличение ок. 10, об × 20. Цифрами помечены: 1 - эпителий, 2 - дерма, 3 - подкожная жировая ткань, 4 - струп, 5 - протоки желез.

Формула изобретения

Ранозаживляющий гель для наружного применения, содержащий хитозан, отличающийся тем, что в качестве активных ингредиентов содержит: салициловую кислоту, биорегулятор, выделенный из сыворотки крови крупного рогатого скота, представляющий собой фракцию кислых белков в интервале значений рН<3,0, и воду, при следующем соотношении компонентов, мас.%:

Изобретение "РАНОЗАЖИВЛЯЮЩИЙ ГЕЛЬ" (Ямсков Игорь Александрович, Ямскова Виктория Петровна, Шайхалиев Астемир Икрамович, Стрецкий Геннадий Михайлович, Ижбирдеев Эльдар Наильевич, Тихонов Владимир Евгеньевич, Рыбакова Елена Юрьевна, Галкин Олег Михайлович, Краснов Михаил Сергеевич) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога