КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ГЕПАРИНА С АНТИКОАГУЛЯНТНЫМИ, АНТИТРОМБОЦИТАРНЫМИ, ФИБРИНОЛИТИЧЕСКИМИ И ФИБРИНДЕПОЛИМЕРИЗАЦИОННЫМИ СВОЙСТВАМИ

Название	КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ГЕПАРИНА С АНТИКОАГУЛЯНТНЫМИ, АНТИТРОМБОЦИТАРНЫМИ, ФИБРИНОЛИТИЧЕСКИМИ И ФИБРИНДЕПОЛИМЕРИЗАЦИОННЫМИ СВОЙСТВАМИ
Разработчик (Авторы)	Исаев В.А., Ляпина Л.А., Григорьева М.Е., Николаева Л.С., Семёнов А.Н., Ершов А.А.
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2456993
Дата регистрации	20.04.2011
Правообладатель	Закрытое Акционерное Общество Научно-производственное предприятие "Тринита"

Описание изобретения

Изобретение относится к медицине и фармакологии и касается создания средства на основе высокомолекулярного гепарина, обладающего антикоагулянтным, антитромбоцитарным, фибринолитическим действием на организм.

Наиболее часто в медицине в качестве антикоагулянтных средств используются препараты на основе гепарина и его производных.

Высокомолекулярный гепарин (ВМГ) является естественным противосвертывающим фактором и относится к антикоагулянтам прямого действия, т.е. непосредственно влияет на факторы свертывания крови. ВМГ обладает не только антикоагулянтным действием, но в некоторой степени может активировать фибринолитические свойства крови и улучшать коронарный кровоток. Введение ВМГ в организм сопровождается некоторым понижением содержания холестерина и β-липопротеидов в сыворотке крови.

Противосвертывающее действие ВМГ проявляется in vitro и in vivo при внутривенном, внутримышечном и подкожном его введении. ВМГ действует быстро, но относительно кратковременно.

ВМГ применяют при профилактике и терапии различных тромбоэмболических заболеваний и их осложнений, например, для предотвращения или ограничения тромбообразования при остром инфаркте миокарда, тромбозах и эмболиях магистральных вен и артерий, сосудов мозга и глаз.

Однако ему присущ ряд отрицательных свойств, таких как тромбоцитопения и аллергические реакции немедленного типа (крапивница, ангионевротический отек или бронхоспазм), при передозировке возможность развития геморрагии.

[Клиническая биохимия / Под ред. В.А.Ткачука. 2-е изд., испр. и доп. М.: ГЭОТАР-МЕД 2004. 512 с.].

Известны антикоагулянтные средства животного происхождения, представляющие собой фрагмент коллагена с М.М. около 12 кДа, содержащий 10,0-12,0% углеводов, 6,0-7,5% сульфатных групп, микро- и макроэлементы.

[Пат. РФ №2302250, А61К 35/56, опубл. 2007.07.10].

Известно антикоагулянтно-фибринолитическое средство, включающее пептид "Семакс" и ВМГ. Наименование пептида "Семакс" утверждено решением Фармакологического комитета МЗ РФ от 11.11.93.

Указанные средства обладают иным механизмом антикоагулянтного действия, чем механизм действия одного ВМГ, однако способ получения их сложен и длителен и, кроме того, антитромбоцитарное и антикоагулянтное действие их недостаточно.

[Пат. РФ №2138289, А61К 31/725, опубл. 1999.09.27].

Известно также антикоагулянтно-фибринолитическое средство комплекса ВМГ с протеолитическим ферментом тромбином. Препарат эффективен только при внутривенном и внутримышечном введениях. Небольшая длительность действия препарата - 1,5-2,0 часа и наличие побочных эффектов не позволяет его широко использовать в медицинской практике.

[Ж. "Биохимия животных и человека", "Неферментативный фибринолиз", Ляпина Л.А. и др. Киев, 1982, №6, с.64-73].

Известен тромболитический комплекс гепарина (ВМГ) с ферментом трипсином, полученный при весовом соотношении 1:6. Однако использование трипсина придает этому продукту токсичные протеолитические свойства. Более того, получаемый препарат активен только при внутривенном или внутримышечном введении [Mansfeld V, Hladovec J. Studien über Reactionen des Kristallisierten Trypsins. II. Beziehung zwischen der Aktivität des Heparins und Trypsins-"Collection of Czechoslovak chemical communication", 1957, т.21, №5, с.1209].

Известна терапевтическая композиция, обладающая антикоагулянтной активностью на основе комплексов гепарина с веществами, усиливающими антикоагулянтное действие, в частности с аминокислотами.

Указанную композицию получают следующим образом. Водный раствор гепарината натрия последовательно наносят на колонки с катионообменной и анионообменной смолой, после чего к полученному фильтрату при перемешивании добавляют водный раствор аминокислоты в соотношении 1:1,1, осаждают полученный комплекс органическим растворителем - спиртом или ацетоном, отделяют осадок центрифугированием, после чего его лиофильно высушивают.

Выход в расчете на исходную антикоагулянтную активность составляет от 100 до 120%. Полученное таким образом средство проявляет антикоагулянтные и незначительные антилипидемические свойства.

К недостаткам известной композиции следует отнести отсутствие фибринолитических и антитромбоцитарных свойств получаемых продуктов.

Более того, способ получения препарата достаточно сложен, требует дорогостоящих материалов и оборудования, получаемые препараты нестабильны и через 17-20 дней хранения наступает потеря активности при хранении при комнатной температуре.

[Патент США №3577534, Кл. С08В 37/10, опубл. 1971.05.04].

Наиболее близкой композицией по ее фармакологическому действию является антитромботическая композиция, на основе высокомолекулярного гепарина и включающая рыбное масло Эйконол. [Пат. РФ №2359681, А61К 31/727, опубл. 2009.06.27].

В указанном патенте используют рыбное масло "Эйконол" фирмы «Тринита», в виде его 25-45% раствора в пищевом растительном масле в количестве 1 мл на 80-120 ME антитромбиновой активности высокомолекулярного гепарина. Используют как жидкий, так и сухой высокомолекулярный гепарин.

Указанное средство получают смешением Эйконола и жидкого ВМГ в объемном соотношении Эйконол:ВМГ, равном 1:0,018-0,022, или сухого ВМГ и Эйконола в количествах 0,8-1,2 вес.ч. гепарина (ВМГ) на 1 об.ч. Эйконола.

Для получения композиции исходный коммерческий препарат Эйконола (Э) разбавляют рафинированным кукурузным маслом до концентрации 25-45% и смешивают с 80-120 ME ВМГ, периодически через каждые 30 мин перемешивают в течение 1-2-х часов при комнатной температуре.

Препарат обладает антикоагулянтным, антитромбоцитарным, фибринолитическим, фибриндеполимеризационным действием при его многократном пероральном введении крысам.

Недостатком указанного средства является его невысокое антикоагулянтное (127,5%), фибринолитическое (140%) и фибриндеполимеризационное (133%) действие; необходимость многократного (не менее 4-х дней) его введения для получения широкого спектра противосвертывающих эффектов; необходимость разбавления коммерческого препарата эйконола пищевым маслом.

Все вышеизложенное позволяет сделать вывод, что поиск новых эффективных и безопасных антикоагулянтов и фибринолитиков остается до настоящего времени чрезвычайно актуальным.

В основу настоящего изобретения положена задача создания более эффективной композиции, обладающей более выраженным антикоагулянтным фибринолитическим (суммарным, ферментативным и неферментативным) и антитромбоцитарным действием при его однократном пероральном применении.

Поставленная задача решается тем, что композиция на основе высокомолекулярного гепарина и рыбного масла Эйконол для перорального применения дополнительно содержит аргинин при следующих количествах компонентов в расчете на 90-120 ME активности гепарина:

аргинин - 20-25 мг,

Эйконол - 1-1,1 мл.

Композиция при использовании жидкого высокомолекулярного гепарина содержит гепарин: аргинин: Эйконол в соотношении, равном 0,018-0,022 (об.ч.):20-25 (вес.ч.):1-1,1(об.ч.).

Композиция при использовании сухого высокомолекулярный гепарин, содержит гепарин:аргинин:Эйконол в соотношении, равном 0,68-0,91 (вес.ч.):20-25 (вес.ч.):1-1,1 (об.ч).

Обычно используют рыбное масло Эйконол в виде его коммерческого препарата.

Пищевое рыбное масло «Эйконол», вырабатываемое согласно ТУ 400 СП «А» - 1145-1-18-92 фирмой "Синтилейт" из тканей пелагических рыб, является продуктом, богатым незаменимыми полиненасыщенными кислотами семейства «Омега-3» с содержанием последних до 30%. Эйконол рекомендуется для лечения поражения кожи и желудочно-кишечного тракта у детей, лечения язвенной болезни желудка и снижения в крови уровня общего холестерина и триглицеридов.

Аргинин - снижает риск развития заболеваний сердечно-сосудистой системы, поддерживая нормальный уровень холестерина и артериального давления в крови; регулирует сосудистую проницаемость и микроциркуляцию, за счет чего улучшает реологические свойства.

Для получения заявленной композиции к исходному коммерческому препарату Эйконола (Э) в объеме 1-1,1 мл добавляют 90-120 ME гепарина (Г) и коммерческий препарат аминокислоты аргинин (А) в количестве 20-25 мг, перемешивая их в течение 35-60 мин при комнатной температуре.

Испытания препарата проводили следующим образом.

В условиях in vitro исходную композицию проверяют на наличие фибриндеполимеризационной активности (фибринолитическую активность неферментативной природы), используя нестабилизированные фактором XIIIa фибриновые пленки. При добавлении композиции к нормальной плазме крови крыс проверяют антикоагулянтные и фибринолитические (ферментативной и неферментативной природы) ее свойства в плазме крови.

В условиях in vivo использовано 10 самцов белых лабораторных крыс с массой тела 200-220. Первая группа крыс (опытная) получала перорально композицию (опыт - Э+Г+А) по 0.05 мл, а вторая - (контрольная) не получала композицию, при этом использовались здоровые крысы-самцы того же веса и возраста. Взятие крови на анализ осуществляли через 1 час после однократного перорального введения препаратов.

В образцах крови определяли: антикоагулянтную активность по тесту активированного частичного тромбопластинового времения (АЧТВ), суммарную (СФА), неферментативную (НФ) фибринолитическую активность и агрегацию тромбоцитов.

Таким образом, композиция Эйконол+ВМГ+аргинин имеет значительные преимущества перед прототипом: 1) обладает in vitro и in vivo высокой антикоагулянтной (выше 160%), антитромбоцитарной (снижение агрегации тромбоцитов на 47-49%), фибриндеполимеризационной (не ниже 200%), суммарной фибринолитической (не ниже 180%) активностью даже в присутствии блокаторов ферментативного фибринолиза, 2) проявляет противосвертывающие эффекты даже при однократном пероральном введении в организм. В организме целевой продукт способен предупреждать и снижать процесс тромбообразования при однократном пероральном применении. В композиции (Э+ВМГ) при однократном применении антикоагулянтная и антитромбоцитарная активность практически не меняется, а при четырехкратном пероральном введении антикоагулянтная активность повышается лишь на 27%, а агрегация тромбоцитов снижается только на 24%. Благодаря этому предлагаемая композиция может снижать риск развития заболеваний сердечно-сосудистой системы, улучшать реологические свойства крови и положительно влиять на потенцию у мужчин (вследствие присутствия в композиции аргинина). Композиция стабильна при хранении при +4°-6°С, нетоксична при пероральном способе введения в организм, длительность действия препарата в организме до 8-10 час. Способ получения его экономически выгоден.

Формула изобретения

1. Композиция на основе высокомолекулярного гепарина и рыбного масла Эйконол с антикоагулянтными, антитромбоцитарными, фибринолитическими и фибриндеполимеризационными свойствами для перорального применения, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит аргинин при следующих количествах компонентов в расчете на 90-120 ME активности гепарина:

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что используют жидкий высокомолекулярный гепарин в соотношении высокомолекулярный гепарин:аргинин:Эйконол, равном 0,018-0,022 (об.ч.):20-25 (вес.ч.):1-1,1 (об.ч.).

3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что используют сухой высокомолекулярный гепарин, аргинин и Эйконол в соотношении 0,68-0,91 (вес.ч.):20-25 (вес.ч.):1-1,1 (об.ч.).

Изобретение "КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНОГО ГЕПАРИНА С АНТИКОАГУЛЯНТНЫМИ, АНТИТРОМБОЦИТАРНЫМИ, ФИБРИНОЛИТИЧЕСКИМИ И ФИБРИНДЕПОЛИМЕРИЗАЦИОННЫМИ СВОЙСТВАМИ" (Исаев В.А., Ляпина Л.А., Григорьева М.Е., Николаева Л.С., Семёнов А.Н., Ершов А.А.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога