АНТИТРОМБОТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ГЕПАРИНА ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ

Название	АНТИТРОМБОТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ГЕПАРИНА ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ
Разработчик (Авторы)	Исаев В.А., Ляпина Л.А., Пасторова В.Е., Оберган Т.Ю., Николаева Л.С.
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2359681
Дата регистрации	31.01.2008
Правообладатель	Закрытое Акционерное Общество Научно-производственное предприятие "Тринита"

Описание изобретения

Изобретение относится к медицине и фармакологии и касается создания средств на основе гепарина, обладающих антикоагулянтным, антитромбоцитарным, фибринолитическим, фибриндеполимеризационным действием на организм.

Наиболее часто в медицине в качестве антикоагулянтных средств используются препараты на основе гепарина и его производных. Гепарин является кислым мукополисахаридом с молекулярной массой около 16000 дальтон. Вырабатывается в организме человека и животных базофильными (тучными) клетками.

Гепарин является естественным противосвертывающим фактором и совместно с фибринолизином входит в состав физиологической антисвертывающей системы. Он относится к антикоагулянтам прямого действия, т.е. непосредственно влияет на факторы свертывания крови (XII, XI, X, IX, VII и II). Кроме того, он блокирует биосинтез тромбина и уменьшает агрегацию тромбоцитов. Противосвертывающее действие гепарина проявляется in vitro и in vivo. Гепарин обладает не только антикоагулянтным действием, но и угнетает активность гиалуронидазы, активизирует в некоторой степени фибринолитические свойства крови и улучшает коронарный кровоток. Введение гепарина в организм сопровождается некоторым понижением содержания холестерина и β-липопротеидов в сыворотке крови [Клиническая биохимия. / Под ред. В.А.Ткачука. 2-е изд., испр. и доп. М.: ГЭОТАР-МЕД, 2004. 512 с.].

Противосвертывающее действие гепарина осуществляется при его введении в вену, мышцы или под кожу. Гепарин действует быстро, но относительно кратковременно.

Гепарин применяют при профилактике и терапии различных тромбоэмболических заболеваний и их осложнений, например для предотвращения или ограничения тромбообразования при остром инфаркте миокарда, тромбозах и эмболиях магистральных вен и артерий, сосудов мозга и глаз.

Однако ему присущ ряд отрицательных свойств, таких как тромбоцитопения и аллергические реакции немедленного типа (крапивница, ангионевротический отек или бронхоспазм). После введения гепарина наблюдается значительное замедление времени рекальцификации плазмы, понижение толерантности и удлинение тромбинового времени. Применяя гепарин необходимо учитывать возможность развития геморрагии. Для предупреждения осложнений препарат вводят только в условиях стационара, ограничивая количество инъекций других лекарств.

Кроме гепарина в последнее десятилетие в медицине вновь стали использоваться антикоагулянтные препараты на основе биологически активных веществ, выделенных из пиявок, и в первую очередь препарат гирудин. Препарат был впервые получен из слюнных желез пиявок Hirudo medicinalis. Относительная эффективность гирудина наиболее выражена в первые сутки и со временем нивелируется. Гирудин в оптимальной дозе не увеличивает существенно риск тяжелых геморрагических осложнений. К недостаткам гирудина следует отнести иммуногенность и преимущественно почечную экскрецию [Warkentin Т.Е. Bivalent direct thrombin inhibitors: hirudin and bivalirudin // Best Practice Res. Clinic. Haemat. 2004. V.17. P.105-125]. [Заявка на выдачу патента РФ №96119944, А61К 38/58, опубл. 1999.02.20].

Известны антикоагулянтные средства животного происхождения, представляющие собой фрагмент коллагена с мол. м. около 12 кДа, содержащий 10,0-12,0% углеводов, 6,0-7,5% сульфатных групп, микро- и макроэлементы. [пат. РФ №2302250, А61К 35/56, опубл. 2007.07.10.]

Известно также применение известного пептида "Семакс" формулы Met-Gly-His-Phe-Pro-Gly-Pro в качестве антитромботического, антикоагулянтного средства для внутривенного и внутрибрюшинного введения [пат. РФ №2286168, А61К 38/08, опубл. 2006.10.27, пат. РФ №2290194, А61К 38/08, опубл. 2006.12.27].

Указанные средства обеспечивают расширение спектра веществ иного механизма антикоагулянтного действия, чем механизм действия гепарина, однако способ получения их сложен и длителен, и, кроме того, антитромбоцитарное и антикоагулянтное действие их недостаточно.

Гепарин часто используют в сочетании с ферментными фибринолитическими препаратами.

Так, например, известно антитромботическое средство комплекса высокомолекулярного гепарина с протеолитическим ферментом тромбином. Средство обладает антикоагулянтными и тромболитическими свойствами, но препарат эффективен лишь при внутривенном и внутримышечном введениях, небольшая длительность действия препарата (1,5-2,0 ч) и наличие побочных эффектов не позволяет его широко использовать в медицинской практике [Ж. "Биохимия животных и человека", "Неферментативный фибринолиз". Ляпина Л.А. и др. Киев, 1982, №6,с.64-73].

Известна также терапевтическая композиция, обладающая антикоагулянтной активностью, на основе комплексов гепарина с веществами, усиливающими антикоагулянтное действие, в частности с аминокислотами, такими как аспарагиновая, глутаминовая, антраниловая, р-аминобензойная, а также с глицином, глутамином, валином и β-аланином.

К недостаткам известной композиции следует отнести отсутствие фибринолитических и тромболитических свойств получаемых продуктов [пат. США №3577534, кл. С08В 37/10, опубл. 1971.05.04].

Известен тромболитический комплекс гепарина с ферментом трипсином, взятом в соотношении 1:6. Однако использование трипсина придает полученному продукту токсичные протеолитические свойства. Более того, получаемый препарат активен только при внутривенном или внутримышечном введении [Mansfeld V., Hladovec J. Studien über Reactionen des Kristallisierten Trypsins. II. Beziehung zwischen der Aktivität des Heparins und Trypsins. - "Collection of Czechoslovak chemical commmiication", 1957, т.21, №5, c.1209].

В качестве прототипа выбрано антитромботическое средство, включающее пептид "Семакс" и гепарин, описанный в пат. РФ №2138269, А61К 31/725, опубл. 1999.09.27, как наиболее близкое к заявляемому средству по фармакологическому действию. Наименование пептида "Семакс" утверждено решением Фармакологического комитета МЗ РФ от 11.11.93 г.

Семакс - синтетический аналог адренокортикотропного гормона, обладающий ноотропными свойствами и лишенный гормональной активности. Обладает избирательным действием на центральную нервную систему, являясь стимулятором умственной работоспособности. Препарат влияет на процессы, связанные с формированием памяти и обучением. Семакс усиливает избирательное внимание и обучение при анализе информации, улучшает запоминание. В условиях нервно- психического утомления препарат облегчает концентрацию внимания, улучшает операторскую деятельность, способствует сохранению и ускоряет восстановление умственной работоспособности.

Указанное средство получают смешением компонентов в весовом соотношении 1:1, инкубируют полученную смесь при 36,5-37,5°С в течение 50-60 мин при pH 3.0-4.0, осаждают продукт центрифугированием с последующим высушиванием. Препарат обладает антитромботическим действием при его многократном интраназальном введении (крысам и другим животным).

Недостатком указанного средства является его невысокое антитромбоцитарное и антикоагулянтное действие, обусловленное в основном интраназальным способом его введения, и недостаточная длительность действия препарата.

Все вышеизложенное позволяет сделать вывод, что поиск новых эффективных и безопасных антикоагулянтов остается до настоящего времени чрезвычайно актуальным.

В основу настоящего изобретения положена задача создания средства, обладающего антикоагулянтным, фибринолитическим (суммарным и неферментативным) и антитромбоцитарным длительным действием при его пероральном применении.

Поставленная задача достигается созданием композиции на основе высокомолекулярного гепарина, для перорального применения дополнительно включающая рыбное масло Эйконол в виде его 25-45% раствора в пищевом растительном масле, при этом содержание гепарина в композиции 80-120 ME антитромбиновой активности высокомолекулярного гепарина на 1 мл Эйконола.

Обычно используют жидкий высокомолекулярный гепарин в объемном соотношении Эйконол:гепарин, равном 1:0,018-0,022, или сухой высокомолекулярный гепарин в количестве 0,8-1,2 вес.ч. на 1 об.ч. Эйконола.

Целесообразно использовать рафинированное пищевое масло, например кукурузное.

Поставленная задача решается также применением композиции на основе гепарина, дополнительно включающей рыбное масло Эйконол в виде его 25-45% раствора в пищевом растительном масле в качестве антикоагулянтного, антитромбоцитарного, фибринолитического, фибриндеполимеризационного средства, для перорального введения

В настоящих исследованиях использовали препарат "Эйконол" фирмы «Тринита» и высокомолекулярный гепарин как отечественного, так и иностранного производства фирмы "Синтилейт."

Масло пищевое «Эйконол», вырабатываемое согласно ТУ 400 СП «А» - 1145-1-18-92 из тканей пелагических рыб, является продуктом, богатым незаменимыми полиненасыщенными кислотами семейства «Омега-3» с содержанием последних до 30%.

Эйконол рекомендуется для лечения поражений кожи и желудочно-кишечного тракта у детей [Патент №2090188, кл. А61К 31/20, А61К 35/60, опубл. 1997.09.20], лечения язвенной болезни желудка [Патент РФ №2120282, кл. А61К 31/20, А61К 35/60, опубл. 1998.10.20] и снижения в крови уровня общего холестерина и триглицеридов [Патент №2055590, кл. А61К 35/60, опубл. 1996.03.10].

Для получения композиции исходный коммерческий препарат Эйконола (Э) разбавляют рафинированным кукурузным маслом до концентрации 25-45% и смешивают с 80-120 ME гепарина (Г), периодически, через каждые 30 мин, перемешивают в течение 1-2-х часов при комнатной температуре.

Эксперимент проводили следующим образом.

Использовано 55 самцов белых лабораторных крыс с массой тела 200-230 г. Первая группа крыс получала в течение 4-х дней перорально Э по 0.05 мл ежедневно через каждые 24 ч, а вторая подобным образом Э+Г. Взятие крови на анализ осуществляли через 1 ч после последнего введения препаратов.

В образцах крови определяли антикоагулянтную активность по тесту активированного частичного тромбопластинового времения (АЧТВ), суммарную (СФА) и неферментативную (НФ) фибринолитическую активность и агрегацию тромбоцитов (по тесту определения неферментативного фибринолиза в присутствии блокаторов ферментативного фибринолиза) и антитромбоцитарную активность по снижению агрегации тромбоцитов от контрольного уровня.

Таким образом, композция Эйконола с гепарином обладает in vitro и in vivo антикоагулянтной, фибринолитической, антитромбоцитарной, высокой фибриндеполимеризационной активностью даже в присутствии блокаторов ферментативного фибринолиза (эпсилон-аминокапроновой кислоты, ингибитора трипсина из соевых бобов). В организме целевой продукт способен предупреждать и снижать уровень тромбообразования при пероральном применении. При пероральном введении Э+Г установлена тенденция к повышению антикоагулянтной активности плазмы и к снижению агрегации тромбоцитов в крови животных при использовании в 5-10 раз меньших доз.

Композиция стабильна при хранении при +4-6°С, нетоксична при пероральном способе введения в организм, длительность действия препарата в организме до 4-5 ч. Способ получения его экономически выгоден.

Формула изобретения

1. Антитромботическая композиция на основе высокомолекулярного гепарина, отличающаяся тем, что для перорального применения она дополнительно содержит рыбное масло Эйконол в виде его 25-45%-ного раствора в пищевом растительном масле в количестве, равном 1 мл Эйконола на 80-120 ME антитромбиновой активности высокомолекулярного гепарина.

2. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что используют жидкий высокомолекулярный гепарин в соотношении Эйконол : гепарин, равном 1 : 0,018-0,022 (по объему).

3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что используют сухой высокомолекулярный гепарин в соотношении 0,8-1,2 мг на 1 мл Эйконола.

4. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что используют рафинированное пищевое масло.

5. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве пищевого масла используют кукурузное масло.

6. Применение композиции по п.1 в качестве антикоагулянтного, антитромбоцитарного, фибринолитического, фибриндеполяризационного средства для перрорального введения.

Изобретение "АНТИТРОМБОТИЧЕСКАЯ КОМПОЗИЦИЯ НА ОСНОВЕ ГЕПАРИНА ДЛЯ ПЕРОРАЛЬНОГО ПРИМЕНЕНИЯ" (Исаев В.А., Ляпина Л.А., Пасторова В.Е., Оберган Т.Ю., Николаева Л.С.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога