ЭКСТРАКТ СОЛОДКИ ГОЛОЙ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ

Название	ЭКСТРАКТ СОЛОДКИ ГОЛОЙ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Разработчик (Авторы)	Сухенко Людмила Тимофеевна, Урляпова Наиля Гайфуловна, Назарова Гузель Наилевна
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2362577
Дата регистрации	27.07.2009
Правообладатель	Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Астраханский государственный университет" (АГУ), Общество с ограниченной ответственностью Научно-производственное предприятие "ГЛИЦИР-ФИТ" (ООО НПП "ГЛИЦИР-ФИТ")
Область применения (класс МПК)	A61K 36/484 (2006.01) A61P 31/06 (2006.01)

Описание изобретения

Изобретение относится к области медицины, а именно к фитотерапии, и представляет собой лекарственное средство растительного происхождения и может быть использовано в качестве профилактического средства противотуберкулезного действия в виде биологических добавок.

Фтизиатрия испытывает трудности, связанные с особенностями течения заболевания туберкулезом. Это выражено резким повышением показателей распространенности инфекции, высоким удельным весом активных и хронических деструктивных процессов, массивным бактериовыделением. Все это приводит к недостаточной результативности специфической терапии, обусловленной нарастанием резистентности возбудителя к традиционным противотуберкулезным препаратам (Васильев А.В., Гришко А.Н. // Туберкулез и город: проблемы профилактики, диагностики и лечения. - СПб., 1996. - С.9-16).

Существуют противотуберкулезные растительные композиции, содержащие цветки багульника, лист подорожника, лист тимьяна, лист крапивы, корень валерианы, лист черной смородины, цветы календулы и корень одуванчика при определенном соотношении компонентов, которые используются на фоне антибактериальной терапии (Патент №96121489 RU, 1996 г.). В патенте представлена многокомпонентная композиция из растений, каждый компонент которой может подавлять активность других и влиять на активность отдельных компонентов, что является недостатком данной композиции.

Известен экстракт пихтовой лапки, используемый для лечения больных инфильтративным туберкулезом легких (Патент №2050855 RU, 1992 г), включающий пероральный прием; растительный экстракт способствует исчезновению побочных явлений, возникающих от введения туберкулостатиков, стимулирует клеточный иммунитет.

Недостатками этого средства является его слабая специфичность. В состав большинства противомикробных средств местного и организменного действия входят антисептики химического происхождения, которые являются для организма ксенобиотиками и обуславливают дополнительное напряжение его метаболизирующих и элиминирующих систем, и являются причиной развития побочных реакций, особенно у детей и больных хроническими заболеваниями.

Задачей настоящего изобретения является выделение растительных веществ из корня и других органов (соцветий, листьев, побегов) растения Glycyrrhiza glabra для создания натурального растительного средства, обладающего значительным противотуберкулезным действием за счет более высоких концентраций биологически активных растительных веществ и не вызывающего побочных явлений при попадании в организм.

Поставленная задача достигается оригинальным способом обработки экстрактов, повышающим содержание в растительных препаратах следующих биологически активных веществ: а) в составе экстракта корня Glycyrrhiza glabra - тритерпеновый сапонин глицирризин, а также Cа и К соли глицирризиновой кислоты (до 20-30%); глицирретиновая кислота (до 10-20%); флавоноиды - ликвиритин, флавин, флавонолы, флавоны, желтый гликозид (до 40-50%); глюкуроновая кислота, дубильные вещества (до 10-15%); - б) в составе вариантов экстракта надземной части (побегов, листьев, соцветий) Glycyrrhiza glabra - тритерпеновый сапонин (до 20-25%), флавонолы - кверцетин, темпферол(до 30-45%); гликозиды флавоноидов - халканы, ауроны (до 5-40%); С-гликозиды, кумарины и др. вещества (до 10-15%).

Отличительной особенностью предлагаемой продукции является то, что авторы впервые для подавления Mc. tuberculosis, активных для организма животных и человека, вызывающих легочные формы туберкулеза, выделили биологически активные вещества и приготовили препарат с противотуберкулезной активностью из различных органов растения Glycyrrhiza glabra.

Согласно биохимическим результатам и литературным данным (Муравьева Д.А., Фармакогнозия) в водно-спиртовых экстрактах (40% спирт) предлагаемых растительных препаратов выделяются следующие биологически активные вещества: в экстрактах корня Glycyrrhiza glabra - тритерпеновый сапонин глицирризин, а также Cа и К соли глицирризиновой кислоты с высоким процентным содержанием, агликон глицирретовой кислоты (сапогенин тритерпенового строения), желтый гликозид ликвиритин (флавин), флавонолы, их агликоновые и гликозидные соединения, халконы, флаваны, флавоноиды, дубильные вещества. В экстрактах наземной части Glycyrrhiza glabra, кроме предыдущих флавоноидов, - кверцетин, изокверцетин, темпферол, халканы, ауроны и др. вещества.

Повышение терапевтической эффективности данных препаратов дает возможность рекомендовать их для внедрения в лабораториях системы здравоохранения в качестве компонентов противотуберкулезных и противомикробных фитопрепаратов.

Результаты научных проработок показали полное или почти полное подавление метаболизма микобактерий под воздействием растительных препаратов из солодки голой, содержащих эти активные вещества.

В опытах исследовано влияние экстрагируемых препаратов в различных концентрациях активных веществ на жизнеспособность чувствительного, выделенного от больных, штамма Mycobacterium tuberculosis (H37RV). Использованы стандартные методы многократных разведений в жидкой прозрачной среде Школьниковой с 0,2 мл культуры Н37RV, разведенной до 10-8, и абсолютных концентраций на плотной питательной среде Левенштейна-Йенсена. Водно-спиртовые экстракты растений цмина песчаного (Helichrysum arenarium L.), тысячелистника мелкоцветкового (Achillea micrantha M.B) в качестве сравнительного примера, а также экстрагируемые препараты корня с корневищем и надземных органов стебля, листьев, соцветий солодки голой (Glycyrrhiza glabra) участвовали в разведениях, соответствующих дозам на сухой вес активных веществ в жидкой среде: 2,5×10-4 мг/мл; 1,25×10-4 мг/мл; 0,625×10-4 мг/мл; 0,313×10-4 мг/мл; 0,156×10-4 мг/мл; 0,078×10-4 мг/мл. Перед применением экстракты подвергались автоклавированию под ватными пробками для соблюдения антисептики и полного удаления остатков спирта.

В таблице №1 представлены результаты исследования противотуберкулезной активности вариантов водно-спиртовых экстрактов из солодки голой.

Ниже приводятся описания результатов исследования противотуберкулезной активности экстрагируемых растительных препаратов, помещенных в таблицу №1.

Пример №1. При разведении экстракта корня солодки голой в дозе 2,5×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта корня солодки голой в дозе 1,25×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта корня солодки голой в дозе 0,625×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта корня солодки голой в дозе 0,313×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта корня солодки голой в дозе 0,156×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта корня солодки голой в дозе 0,078×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью (фиг.2а).

Пример №2. При разведении экстракта стебля солодки голой в дозе 2,5×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта стебля солодки голой в дозе 1,25×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта стебля солодки голой в дозе 0,625×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта стебля солодки голой в дозе 0,313×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта стебля солодки голой в дозе 0,078×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта стебля солодки голой в дозе 0,156×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

Пример №3. При разведении экстракта соцветий солодки голой в дозе 2,5×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта соцветий солодки голой в дозе 1,25×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта соцветий солодки голой в дозе 0,625×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта соцветий солодки голой в дозе 0,313×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта соцветий солодки голой в дозе 0,156×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта соцветий солодки голой в дозе 0,078×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично (фиг.2б).

Пример №4. При разведении экстракта листьев солодки голой в дозе 2,5×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта листьев солодки голой в дозе 1,25×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта листьев солодки в дозе 0,625×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта листьев солодки голой в дозе 0,313×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта листьев солодки голой в дозе 0,156×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта листьев солодки голой в дозе 0,078×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично (фиг.2в).

Пример №5

При разведении экстракта соцветий тысячелистника мелкоцветкового в дозе

0,625×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта соцветий тысячелистника мелкоцветкового в дозе 1,25×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта соцветий тысячелистника мелкоцветкового в дозе 0,313×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта соцветий тысячелистника мелкоцветкового в дозе 0,156×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта соцветий тысячелистника мелкоцветкового в дозе 0,078××10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично (фиг.2г).

Пример №6. При разведении экстракта таллома пармелии в дозе 2,5×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта таллома пармелии в дозе 0,625×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта таллома пармелии в дозе 1,25×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта таллома пармелии в дозе 0.313×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта таллома пармелии в дозе 0,156×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта таллома пармелии в дозе 0,078×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично (фиг.2д).

Пример №7. При разведении экстракта соцветий цмина песчаного в дозе 2,5×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта соцветий цмина песчаного в дозе 1,25×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта соцветий цмина песчаного в дозе 0,625×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен полностью.

При разведении экстракта соцветий цмина песчаного в дозе 0,313×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта соцветий цмина песчаного в дозе 0,156×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично.

При разведении экстракта соцветий цмина песчаного в дозе 0,078×10-4 мг/мл активных веществ рост Mycobacterium tuberculosis был подавлен частично (фиг.2е).

Таким образом, исследования показали, что наиболее высокий ингибирующий эффект зарегистрирован у экстракта из корня солодки, затем экстрактов стебля, соцветий и листьев солодки голой Glycyrrhiza glabra (варианты) по сравнению с экстрактами растений, взятых для сравнения (лишайник - пармелия блуждающая Parmelia vagans, тысячелистник мелкоцветковый - Achillea micrantha М.В, цмин песчаный - Helichrysum arenarium L.).

Активность растительных препаратов из трех растений Glycyrrhiza glabra - заявленный препарат из смеси экстракта корня и др. частей солодки голой (варианты), Helichrysum arenarium, Achillea micrantha (сравнительные препараты) против Mycobacterium tuberculosis (H37RV) далее была изучена в методе диффузии в питательную среду, на которой были засеяны микобактерии туберкулеза (фиг.1). Контрольными в этом методе для сравнения активности были взяты диски, пропитанные известными антибиотиками: левомицетином, фурагином, пенициллином. В результате экстракты, помещенные в лунки зараженной питательной среды в дозе 0,625×10-4 мг/мл, показали противотуберкулезную активность в этом методе на уровне наиболее активного антибиотика. Левомицетин образовал диаметр зоны задержки роста микроорганизма - 32 мм; фурагин - 23,5 мм; пенициллин - 4,5 мм; экстракты Achillea micrantha - 21,5 мм; Glycyrrhiza glabra - 32,5 мм; Helichrysum arenarium - 25 мм).

Результаты этого метода отражены на фиг.1.

На фиг.2 представлены фотографии результатов подавления формирования колоний микобактерий туберкулеза под воздействием экстрагируемого препарата корня и других частей растения солодки голой в сравнении с экстрактами других растений, помещенных в таблицу №1 и описанных здесь.

Предлагаемые препараты - экстракт Glycyrrhiza glabra (варианты) обладают выраженной противотуберкулезной активностью и могут служить готовыми препаратами для использования в комплексной противотуберкулезной терапии, а также профилактическим средством и в качестве биодобавок при длительном течении болезни и для лучшего эффекта выздоровления больных.

Формула изобретения

1. Экстракт солодки голой, обладающий противотуберкулезной активностью, характеризующийся тем, что он получен путем экстракции наземной или подземной частей солодки голой Glycyrrhiza glabra 40%-ным этиловым спиртом при соотношении 1:5 и выдерживанием экстракта в темном месте при комнатной температуре в течение 10 дней с последующим фильтрованием и автоклавированием, при этом экстракт из подземной части содержит 20-30% глицирризина и солей Cа и К глицирризиновой кислоты, 10-20% глицирретиновой кислоты, 40-50% флавоноидов (ликвиритин, флавин, флавонолы, флавоны), 10-15% дубильных веществ, лектиновых белков и углеводов и экстракт из наземной части содержит 20-25% тритерпенового сапонина, 30-45% флавонолов (кверцетин, темпферол), 25-40% флавоноидов (халканы, ауроны), 10-15% С-гликозидов, кумаринов и лектиновых белков.

2. Применение экстракта солодки голой по п.1 в качестве средства, обладающего противотуберкулезной активностью.

3. Способ получения экстракта солодки голой по п.1, характеризующийся тем, что наземную или подземную части солодки голой Glycyrrhiza glabra экстрагируют 40%-ным этиловым спиртом при соотношении 1:5, далее экстракт выдерживают в темном месте при комнатной температуре в течение 10 дней, фильтруют и автоклавируют под давлением 0,3-0,5 атм в течение 15-30 мин.

Изобретение "ЭКСТРАКТ СОЛОДКИ ГОЛОЙ, ОБЛАДАЮЩИЙ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНОЙ АКТИВНОСТЬЮ" (Сухенко Людмила Тимофеевна, Урляпова Наиля Гайфуловна, Назарова Гузель Наилевна ) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога