L международная выставка-презентация
научных, технических, учебно-методических и литературно-художественных изданий

Рекомбинантный белок, содержащий антигенно-значимые фрагменты белков вируса гепатита Е, используемый в тест-системах для серодиагностики гепатита Е (варианты)


НазваниеРекомбинантный белок, содержащий антигенно-значимые фрагменты белков вируса гепатита Е, используемый в тест-системах для серодиагностики гепатита Е (варианты)
Разработчик (Авторы)Алаторцева Г.И., Сидоров А.В., Нестеренко Л.Н., Лухверчик Л.Н., Амиантова И.И., Доценко В.В., Воробьев Д.С., Аммур Ю.И., Жукина М.В., Байызбекова Д.А., Михайлов М.И., Потемкин И.А., Кюрегян К.К., Нурматов З.Ш., Нурматов А.З., Касымов О.Т., Жаворонок С.В., Красочко П.А., Зверев В.В.
Вид объекта патентного праваИзобретение
Регистрационный номер 2711907
Дата регистрации23.01.2020
ПравообладательФедеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова" (ФГБНУ НИИВС им. И.И. Мечникова)
Область применения (класс МПК) C12N 15/00 (2006.01) C12N 7/00 (2006.01)

Описание изобретения

Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии и представляет собой рекомбинантный белок, содержащий антигенно-значимый фрагмент белка вируса гепатита Е 1 генотипа, используемый в тест-системах для серодиагностики гепатита Е (варианты). Изобретение позволяет повысить точность результатов в тест-системах путем снижения ложноположительных результатов. 4 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и иммунологии и представляет собой способ получения рекомбинатных белков путем синтеза в бактериальных клетках, обладающих антигенной активностью к вирусу гепатита Е, и набор белков, полученных этим способом и позволяющих проводить серодиагностику гепатита Е.

Гепатит Е представляет значимую проблему для здравоохранения, и неоспоримо важным является совершенствование его лабораторной диагностики. Основным лабораторным показателем инфицирования вирусом гепатита Е (ВГЕ) является выявление в сыворотке крови больных специфических антител методом иммуноферментного анализа (ИФА). Из-за трудностей, связанных с культивированием ВГЕ известные к настоящему времени диагностические тест-системы основаны главным образом на использовании рекомбинантных антигенов.

Многочисленные исследования молекулярно-биологических основ иммунного ответа на вирус гепатита Е позволили определить структуру вирусного генома и локализовать основные вирусные антигенные детерминанты. Благодаря определению нуклеотидных последовательностей геномов вирусных изолятов различного географического происхождения и успехам в изучении антигенной структуры вирусных белков доказано существование двух основных серовариантов вируса: серотипа Бирма, к которому относят вирусные изоляты азиатского происхождения, и серотипа Мексика, объединяющего американские изоляты.

Первоначально диагностика гепатита Е основывалась на серологическом исключении вирусных гепатитов другой этиологии. Большинство разработаных к настоящему времени методов диагностики гепатита Е основано на определении антител к белкам-продуктам второй и третьей открытых рамок считывания генома вируса гепатита Е в сыворотках крови (серодиагностика). Для этих целей используются различные подходы, в которых применяется принцип иммуноферментного анализа (ИФА), метода иммунофлюоресценции, иммуноблотинга. Применение этой группы методов базируется на использовании синтетических пептидов-фрагментов вирусных белков или рекомбинантных полипептидов, содержащих фрагменты вирусных антигенов. Одним из наиболее перспективных путей совершенствования диагностических тест-систем является применение в качестве антителосвязывающего субстрата рекомбинантных белков вируса гепатита Е, синтезированных в различных экспрессирующих системах. Такие рекомбинантные белки, сохраняющие антигенные детерминанты вируса гепатит Е, используются в серодиагностике заболевания, обеспечивая высокие показатели чувствительности и специфичности используемых тестов (патент US 5563032, кл. 435/5, 08.10.96)....................

Формула изобретения

1. Рекомбинантный белок, содержащий антигенно-значимый фрагмент белка вируса гепатита Е 1 генотипа, используемый в тест-системах для серодиагностики гепатита Е, где рекомбинантный белок имеет аминокислотную последовательность

причем последовательность без учета белка-носителя (бета-галактозидазы), С-концевой фрагмент, почти полноразмерный белковый продукт ОRF3 (жирный шрифт) - без одного Arg на С-конце (канонически Gln-Leu-Gly-Pro-Arg-Arg), последние 8 аминокислотных остатков на С-конце относятся к вектору (не выделены жирным шрифтом).

2. Рекомбинантный белок, содержащий антигенно-значимый фрагмент белка вируса гепатита Е 3 генотипа, используемый в тест-системах для серодиагностики гепатита Е, где рекомбинантный белок имеет аминокислотную последовательность

Asp Leu Pro Gln Leu Gly Leu Arg Arg Leu Gln Pro Ser Leu Leu Ile Asp

причем последовательность без учета белка-носителя (бета-галактозидазы), полноразмерный белковый продукт ORF3 (жирный шрифт), последние 9 аминокислотных остатков на С-конце относятся к вектору (не выделены жирным шрифтом).

3. Рекомбинантный белок, содержащий антигенно-значимые фрагменты белка вируса гепатита Е 1 генотипа, где рекомбинантный белок имеет аминокислотную последовательность

причем последовательность без учета бета галактозидазы, только С-концевой фрагмент 405-660 ако фрагмент белка ORF2 (полноразмерный 660 ако).

4. Рекомбинантный белок, содержащий антигенно-значимый фрагмент белка вируса гепатита Е 3 генотипа, где рекомбинантный белок имеет аминокислотную последовательность

причем последовательность без учета белка-носителя (бета-галактозидазы), только С-концевой фрагмент, фрагмент белка ORF2 с 405-й по 660-ю аминокислоту (полноразмерный белок 660 аминокислотных остатков), последние 12 аминокислотных остатков на С-конце относятся к вектору (не выделены жирным шрифтом).

Изобретение "Рекомбинантный белок, содержащий антигенно-значимые фрагменты белков вируса гепатита Е, используемый в тест-системах для серодиагностики гепатита Е (варианты)" (Алаторцева Г.И., Сидоров А.В., Нестеренко Л.Н., Лухверчик Л.Н., Амиантова И.И., Доценко В.В., Воробьев Д.С., Аммур Ю.И., Жукина М.В., Байызбекова Д.А., Михайлов М.И., Потемкин И.А., Кюрегян К.К., Нурматов З.Ш., Нурматов А.З., Касымов О.Т., Жаворонок С.В., Красочко П.А., Зверев В.В.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля