СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НАГНОИВШЕЙСЯ ПОСТНЕКРОТИЧЕСКОЙ ПСЕВДОКИСТЫ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

Название	СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НАГНОИВШЕЙСЯ ПОСТНЕКРОТИЧЕСКОЙ ПСЕВДОКИСТЫ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
Разработчик (Авторы)	Рейс Альберт Борисович, Рейс Борис Альбертович, Соколова Татьяна Федоровна, Ершов Антон Валерьевич
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2578448
Дата регистрации	27.03.2016
Правообладатель	государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Омская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ОмГМА Минздрава России)
Область применения (класс МПК)	G01N 33/533 (2006.01)

Описание изобретения

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии.

Известны критерии диагностики постнекротической псевдокисты поджелудочной железы: по уровню глутатиона, мочевой кислоты, малонового диальдегида в эритроцитах и плазме, содержанию олигопептидов в эритроцитах и плазме (Морозов С.В. Клинико-патогенетическое обоснование диагностики, лечения и прогнозирования при остром панкреатите и его осложнениях (клинико-экспериментальное исследование). - Дисс. докт. мед. наук. - Омск, 2006).

Известны лабораторные критерии диагностики при нагноившейся постнекротической псевдокисте поджелудочной железы: изменения субпопуляционного состава лимфоцитов, содержания провоспалительных цитокинов, некроза опухоли (THF-α), который увеличивается в крови при нагноении постнекротической кисты (Тропина И.В. Клинико-патофизиологические аспекты в диагностике и лечении больных с постнекротическими псевдокистами поджелудочной железы. - Автореф. канд. мед наук. - Омск, 2007; Морозов С.В., Полуэктов В.Л., Долгих В.Т., Рейс А.Б., Ершов А.В., Рейс Б.А. Иммунные нарушения у больных с постнекротическими кистами поджелудочной железы //Антибиотики и химиотерапия. - 2012. - №11-12. - С. 22-25; Ершов А.В., Долгих Т.И., Морозов С.В., Рейс А.Б., Тропина И.В. Прогнозирование инфекционных осложнений постнекротических псевдокист поджелудочной железы // Омский научный вестник. - 2013. - №1(118). - С. 57-59 (прототип изобретения)

Недостатком известного способа диагностики нагноения постнекротической псевдокисты поджелудочной железы является то, что он не достаточно точен, не характеризует активность фагоцитов, с которыми непосредственно связаны инфекционные, гнойные осложнения.

Задача изобретения - повышение точности, эффективности диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы.

Поставленная задача достигается тем, что способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы осуществляют путем исследования в крови больного лейкоцитов и отличается тем, что с целью повышения точности диагностики, методом проточной цитометрии на приборе «CYTOMICS FC-500», определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14+/HLA-DR+, используют современный точный статистический метод ROC-анализ, и если содержание CD14+/HLA-DR+ ниже 85%, диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.

В контрольной группе практически здоровых лиц (20) уровень клеток, экспрессирующих CD 14+/HLA-DR+ составил 88,4±2,2%.

Способ осуществляют следующим образом. У больного с постнекротической псевдокистой поджелудочной железы производят забор пробы крови, в которой на проточном питометре «CYTOMICS FC-500» определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD14+/HLA-DR+.

Оценку маркеров клеточной дифференцировки проводили на проточном цитометре (CYTOMICS FC 500, Beckman Coultr, США) с использованием видоспецифических моноклональных антител (Beckman Coulter, США). Определяли количество CD 14+/HLA-DR+ клеток в крови.

Определение субпопуляционного состава лимфоцитов на проточных цитометрах является наиболее точным и современным методом диагностики. С помощью проточной цитометрии определяют активность фагоцитов по плотности, однако при уменьшении или отсутствии молекул HLA-DR на поверхности мембран моноциты не могут выполнять свою антиген-презентутощую функцию и не обладают способностью продуцировать воспалительные медиаторы в ответ на соответствующие стимулы (Wolk К. Comparison of monocyte functions after LPS- or IL-10-induced reorientation: importance in clinical immunoparalysis // Pathobiology. - 1999. - Vol.67. - P. 253- 256; Pitton С.Different regulation TNF-a and IL-1 ra synthesis in LPS-tolerant human monocytes // Prog. Clin. Biol. Res. - 1995. - Vol.392. - P. 523-528).

Для оценки эффективности диагностики используют референтные данные. Вычисляют следующие расчетные показатели.

Чувствительность (Se) - определяется как доля больных, у которых выявляется снижение содержания CD14+/HLA-DR+. Чем выше процент чувствительности, тем лучше тест для диагностики изучаемого критерия.

Специфичность (Sp) - это частота отсутствия изменений данного показателя у здоровых людей. Чем больше процент специфичности изучаемого теста, тем выше уровень доказательности для более качественной диагностики изучаемой величины (Власов В.В. Введение в доказательную медицину // М.: Медиа Сфера, 2001. - 392 с.; Власов В.В. Что такое ежегодный справочник «Доказательная медицина» и как им пользоваться // Междунар. журнал медицинской практики. - 2002. - №1. - С. 5-8).

В настоящее время наиболее полным и современным методом оценки информативности и точности диагностического теста является ROC-анализ (Receiver Operating Characteristic analysis) - характеристическая кривая взаимной зависимости чувствительности и специфичности тестов с использованием взвешенной линейной регрессии. Информативность диагностического теста определяется тем, насколько высоко лежит его характеристическая кривая. Чем ближе площадь под кривой (AUC) к площади квадрата (условно принятую за 1), тем эффективнее диагностический тест. Чем ближе кривая к диагонали, тем ниже эффективность диагностического метода (О.Ю. Реброва. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. - Издательство Медиа Сфера, 2006).

Если содержание CD14+/HLA-DR+ ниже 85%, то диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.

Пример 1. Больной М., при поступлении клинический диагноз: постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. У больного производят забор пробы крови, который помещают в контейнер проточного цитометра «CYTOMICS FC-500» и определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD 14+/HLA-DR+. В данном случае оно составило 89%, что исключает диагноз нагноившаяся постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. Больному была проведена трансгастральная цистогастростомия на наружном дренаже из мини-доступа. Выписан в удовлетворительном состоянии через 14 дней.

Пример 2. Больной Ж., при поступлении клинический диагноз: постнекротическая псевдокиста поджелудочной железы. У больного производят забор пробы крови, который помещают в контейнер проточного цитометра «CYTOMICS FC-500» и определяют субпопуляционный состав лимфоцитов, относительное содержание CD14+/HLA-DR+. В данном случае оно составило 84%, что соответствовало критерию нагноившейся постнекротической псевдокисты. Больному была выполнена операция: наружное дренирование псевдокисты поджелудочной железы. Выписана в удовлетворительном состоянии на 28 день.

Предложенным способом обследованы 20 практически здоровых пациентов (группа I), 25 больных с неосложненной постнекротической псевдокистой поджелудочной железы (подгруппа II1) и 24 больных, у которых наблюдались нагноения (подгруппа II2). Была построена ROC-кривая. Результаты представлены в таблице 1.

Согласно нашим данным использование в качестве критерия оценки нагноившейся кисты поджелудочной железы CD 14+/HLA-DR+ имеет высокую прогностическую силу (доверительный интервал AUC 0,9-1,0) (табл. 1).

Таким образом, диагностика нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы может осуществляться с высокой частотой положительных результатов с помощью такого показателя, как содержание в крови CD14+/HLA-DR+.

Технический результат: способ диагностики обладает высокой прогностической силой, позволяет более точно определять тактику ведения таких больных, осуществлять правильный выбор оперативного вмешательства.

Формула изобретения

Способ диагностики нагноившейся постнекротической псевдокисты поджелудочной железы включает исследование в крови больного лейкоцитов и отличается тем, что определяют активность фагоцитов по уровню экспрессии CD 14+/HLA-DR+, при этом используют метод проточной цитометрии и статистический метод ROC-анализ, и если содержание CD14+/HLA-DR+ ниже 85%, то диагностируют нагноившуюся постнекротическую псевдокисту поджелудочной железы.

Изобретение "СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ НАГНОИВШЕЙСЯ ПОСТНЕКРОТИЧЕСКОЙ ПСЕВДОКИСТЫ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ" (Рейс Альберт Борисович, Рейс Борис Альбертович, Соколова Татьяна Федоровна, Ершов Антон Валерьевич ) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога