Изобретения относятся к области медицины и могут быть использованы в качестве основного лечебно-профилактического мероприятия и средства, направленных на предупреждение поражения печени при формировании синдрома сочетанных дистрофически-дегенеративных изменений мезенхимальных производных при локальном хроническом воспалительном процессе.

Современные условия техногенной цивилизации способствуют широкому распространению воспалительных заболеваний. Многие исследователи связывают высокую частоту хронических заболеваний различных органов и систем с воздействием неблагоприятных экологических факторов, несвоевременным и неадекватным лечением острых инфекционно-воспалительных процессов, развивающихся на фоне несовершенного иммунного ответа на этиологический фактор.

Длительное существование фокальной (локальной) персистирующей инфекции вызывает определенное изменение функционирования основных гомеостатических систем и, как следствие, структурную перестройку органов и тканей организма. Описан синдром сочетанных дистрофически-дегенеративных изменений мезенхимальных производных при локальном хроническом воспалительном процессе (синдром СДДИМП при ЛХВП) (Команденко Н.И., Жураковский И.П., Рыжов А.И. Синдром сочетанных дистрофически-дегенеративных изменений в производных мезенхимы при воздействии фокальной персистирующей инфекции. Свидетельство об интеллектуальной собственности, зарегистрированное ВНТИЦ 07.08.2002 г., №72200200029), основным составляющим которого является реакция соединительной ткани (Команденко Н.И., Рыжов А.И., Жураковский И.П. Остеохондроз позвоночника: Монография. - Новосибирск: Сибмедиздат НГМУ, 2006. - 246 с.). Как показывает клиническая практика, при наличии очагов хронической инфекции часто диагностируется полиорганная патология, связанная с усиленным фиброгенезом на фоне неспецифических реактивных воспалительных процессов. При этом данные изменения зачастую затрагивают печень, проявляясь неспецифическим реактивным гепатитом и фиброзом.

Если для лечения заболеваний, вызываемых этиологическими факторами, воздействующими непосредственно на печень (вирусные, алкогольные гепатиты, паразитарные заболевания печени и др.), разработано немало средств, то средств для лечения и предупреждения поражения печени при синдроме СДДИМП при ЛХВП в настоящее время нет, и в этом случае применяют только симптоматические средства.

Поскольку мы не нашли в уровне техники сведений о средствах для профилактики и лечения патологии печени, обусловленной СДДИМП при ЛХВП, рассмотрим известные работы и средства, направленные на лечение заболеваний, вызываемых этиологическими факторами, воздействующими непосредственно на печень.

В некоторых работах (при заболеваниях, вызываемых этиологическими факторами, воздействующими непосредственно на печень) показано, что фиброз печени может иметь обратное развитие. Так, был продемонстрирован его регресс после хирургической декомпрессии билиарной обструкции у пациентов с хроническим панкреатитом, вызвавшем стеноз общего желчного протока (Hammel P, Couvelard A, O'Toole D, et al. Regression of liver fibrosis after biliary drainage in patients with chronic pancreatitis and stenosis of the common bile duct. N Engl J Med. 2001 Feb 8; 344(6):418-23).

При хроническом гепатите C долговременная терапия интерфероном-альфа даже при отсутствии вирусологического ответа способствует уменьшению фибротических явлений (Dufour JF, DeLellis R, Kaplan MM. Regression of hepatic fibrosis in hepatitis С with long-term interferon treatment. Dig Dis Sci. 1998 Dec; 43(12):2573-6; Poynard T, McHutchison J, Manns M, et al. Impact of pegylated interferon alfa-2b and ribavirin on liver fibrosis in patients with chronic hepatitis C. Gastroenterology. 2002 May; 122(5):1303-13). Аналогичные данные отмечаются при применении рибавирина (Poynard Т, McHutchison J, Manns M, et al. Impact of pegylated interferon alfa-2b and ribavirin on liver fibrosis in patients with chronic hepatitis C. Gastroenterology. 2002 May; 122(5):1303-13).

Последние годы ознаменовались определенными успехами в расшифровке механизмов, приводящих к формированию фиброза. Это определило современные направления разработки терапевтического лечения рассматриваемой патологии. Так, было предложено ингибировать факторы, влияющие на ангиогенез: на сосудистый эндотелиальный фактор роста было предложено воздействовать рапамицином (rapamycin); на тромбоцитарный фактор роста - воздействовать препаратом гливек (Gleevec), что позволило уменьшить портальную гипертензию и выраженность соединительнотканных разрастаний в портальной системе (Fernandez M, Mejias M, Garcia-Pras E, et al. Reversal of portal hypertension and hyperdynamic splanchnic circulation by combined vascular endothelial growth factor and platelet-derived growth factor blockade in rats. Hepatology. 2007; 46:1208-1217).

Однако большинство современных исследований по фиброзу печени сфокусировано на роли клеток Ито. Воздействие на них ретинола или ферментов, регулирующих его обмен, может нивелировать процесс активации звездчатых клеток печени. Так, в эксперименте, ингибирование диацилглицерол ацилтрансферазы (фермента, регулирующего обмен ретинола) привело к уменьшению фиброза печени (Yamaguchi K, Yang L, McCall S, et al. Diacylglycerol acyltranferase 1 antisense oligonucleotides reduce hepatic fibrosis in mice with nonalcoholic steatohepatitis. Hepatology. 2008; 47:625-635).

Учитывая, что TGF-β поддерживает клетки Ито в состоянии активации и стимулирует продукцию соединительной ткани, был показан антифибротический эффект траниласта (tranilast), который тормозил действие этого цитокина при неалкогольном жировом гепатозе (Uno М, Kurita S, Misu H, et al. Tranilast, an antifibrogenic agent, ameliorates a dietary rat model of nonalcoholic steatohepatitis. Hepatology. 2008; 48:109-118). Аналогичным действием обладает метилендиоксибензен (methylenedioxybenzene) (Oh SW, Kim DH, На JR, Kim DY. Anti-fibrotic effects of a methylenedioxybenzene compound, CW209292 on dimethylnitrosamine-induced hepatic fibrosis in rats. Biol Pharm Bull. 2009 Aug; 32(8):1364-70).

Армепавин (armepavine) обладает многогранным воздействием на активированные клетки Ито, в том числе на генном уровне, что обуславливает его антифибротический эффект (Weng TC, Shen CC, Chiu YT, et al. Inhibitory effects of armepavine against hepatic fibrosis in rats. J Biomed Sci. 2009 Sep 2; 16:78).

В экспериментах подтверждено, что фактором, способствующим обратному развитию фиброза, может быть индукция апоптоза звездчатых клеток печени глиотоксином (gliotoxin) (Wright MC, Issa R, Smart DE, et al. Gliotoxin stimulates the apoptosis of human and rat hepatic stellate cells and enhances the resolution of liver fibrosis in rats. Gastroenterology. 2001; 121:685-698) или его производным - синаптофизином (synaptophysin) (Douglass A, Wallace K, Parr R, et al. Antibody-targeted myofibroblast apoptosis reduces fibrosis during sustained liver injury. J Hepatol. 2008; 49:88-98).

Олмесартан (olmesartan), обладая антиоксидантными свойствами и способностью тормозить активацию клеток Ито, также препятствует развитию фиброза (Kurita S, Takamura T, Ota T, et al. Olmesartan ameliorates a dietary rat model of nonalcoholic steatohepatitis through its pleiotropic effects. Eur J Pharmacol. 2008; 588:316-324).

Определенные успехи в изучении возможной коррекции фиброза печени с помощью растительных препаратов представлены в работах, использующих традиционные китайские или тибетские рецепты (Wang YP, Cheng ML, Zhang BF, et al. Effects of blueberry on hepatic fibrosis and transcription factor Nrf2 in rats. World J Gastroenterol. 2010 Jun 7; 16(21):2657-63; Yang Q, Xie RJ, Geng XX, Luo XH, Han B, Cheng ML. Effect of Danshao Huaxian capsule on expression of matrix metalloproteinase-1 and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 in fibrotic liver of rats. World J Gastroenterol. 2005; 11:4953-4956; Tasci I, Mas MR, Vural SA, et al. Pegylated interferon-alpha plus taurine in treatment of rat liver fibrosis. World J Gastroenterol. 2007; 13:3237-3244; Geng XX, Yang Q, Xie RJ,. et al. Effects of Dan-Shao-Hua-Xian on the expression of collagen type I and III in rats with hepatic fibrosis. Hepatobiliary Pancreat Dis Int. 2004; 3:558-563; Geng XX, Yang Q, Xie RJ, et al. In vivo effects of Chinese herbal recipe, Danshaohuaxian, on apoptosis and proliferation of hepatic stellate cells in hepatic fibrotic rats. World J Gastroenterol. 2005; 11:561-566; Yang FR, Fang BW, Lou JS. Effects of Haobie Yangyin Ruanjian decoction on hepatic fibrosis induced by carbon tetrachloride in rats. World J Gastroenterol. 2010 Mar 28; 16(12):1458-64; Kim HK, Yang TH, Cho HY Antifibrotic effects of green tea on in vitro and in vivo models of liver fibrosis. World J Gastroenterol. 2009 Nov 7; 15(41):5200-5; Peng XD, Dai LL, Huang CQ, et al. Correlation between anti-fibrotic effect of baicalin and serum cytokines in rat hepatic fibrosis. World J Gastroenterol. 2009 Oct 7; 15(37):4720-5; Ginsburg I, Koren E, Horani A, et al. Amelioration of hepatic fibrosis via Padma Hepaten is associated with altered natural killer Т lymphocytes. Clin Exp Immunol. 2009 Jul; 157(1):155-64).

Однако такие из описанных выше лекарственных средств, как гливек, траниласт, рапамицин, ольмесартан медоксомил являются достаточно токсичными. Гливек (Glivec) является противоопухолевым препаратом. Его применение может сопровождаться изменениями со стороны системы кроветворения, нервной и сердечно-сосудистой систем, органов зрения; отмечаются нарушения метаболизма и питания, психические нарушения. Траниласт обладает мембраностабилизирующим, бронходилатирующим, противоаллергическим действием. При его применении в ряде случаев отмечаются побочные действия со стороны центральной нервной системы, органов желудочно-кишечного тракта и кроветворения, мочевыделительной системы. Ольмесартан медоксомил показан при эссенциальной артериальной гипертонии. При его применении могут отмечаться побочные действия на сердечно-сосудистую, дыхательную, пищеварительную, центральную нервную системы, органы кроветворения. Рапамицин является макролидом и иммуносупрессором, он применяется при профилактике отторжения трансплантата (у взрослых больных с низким и умеренным иммунологическим риском). К его побочным действиям относятся развитие лимфоцеле, нарушение заживления ран, развитие грибковых, вирусных и бактериальных инфекций, гепатотоксичность.

Другие вышеописанные средства (метилендиоксибензен (methylenedioxybenzene), армепавин (armepavine), глиотоксин (gliotoxin), синаптофизин (synaptophysin)) не являются лекарственными средствами.

И, наконец, как выше уже было подчеркнуто, рассмотренные средства предназначены для лечения тех заболеваний печени, которые вызываются этиологическими факторами, воздействующими непосредственно на печень (в исследованиях на людях это был вирус гепатита или воздействие желчи на печень в результате стеноза общего желчного протока; в экспериментах на животных использовались модели острого повреждения печени с помощью четыреххлористого углерода, диметилнитрозамина или лигирования общего желчного протока). Развитие патологии печени, в частности, фиброза в этом случае идет иным путем, чем при СДДИМП при ЛХВП.

Остановимся на этом подробнее.

В описанных исследованиях наблюдались грубые деструктивные изменения клеток печени с образованием некрозов и выраженной воспалительной реакцией. Основную роль в продукции соединительной ткани в этом случае играют клетки Ито (жирозапасающие клетки, звездчатые клетки печени), расположенные в перисинусоидальном пространстве. При гепатитах различной этиологии в результате повреждения гепатоцитов из них выделяются биологически активные вещества, включающие перекиси и протеазы. Эти вещества активируют макрофаги печени, а также клетки эндотелия синусоидов. Активированные клетки, в свою очередь, начинают секретировать биологически активные вещества, вызывающие активацию клеток Ито. К разряду подобных веществ относятся провоспалительные цитокины - интерлейкин-1 (IL-1), фактор некроза опухоли альфа (TNFα), перекиси, оксид азота, эндотелин, но главная роль в активации липоцитов принадлежит тромбоцитактивирующему фактору (PDGF), активатору плазминогена, трансформирующему фактору роста бета 1 (TGFβ1). Под их воздействием клетки Ито выходят из состояния покоя, становятся активированными и трансформируются в миофибробластоподобный фенотип, приобретая способность к продукции компонентов экстрацеллюлярного матрикса, в том числе коллагена и протеогликанов.

Развитие фиброза в описанных исследованиях идет следующим путем: разрушение гепатоцитов → некроз, воспаление, сопровождающиеся активацией макрофагов печени, клеток эндотелия синусоидов → активация клеток Ито → продукция компонентов экстрацеллюлярного матрикса, в том числе коллагена и протеогликанов.

При развитии синдрома СДДИМП при ЛХВП, находящемся вне печени, наблюдается совершенно иная ситуация и развитие фиброза идет иным путем. В организме формируется очаг хронической инфекции в отдаленном органе (в данном случае, в большеберцовой кости), что исключает непосредственное воздействие на печень. Это приводит не к прямому поражению печени, а к системным изменениям мезенхимальных производных в организме, в том числе и к изменениям морфофункциональной организации соединительной ткани, находящейся в печени. В данном случае имеет место не острое воздействие на печень, приводящее к массовой гибели клеточных элементов и, как следствие, к запуску воспалительного процесса в печени, а хроническое, сопровождающееся умеренными дистрофическими изменениями гепатоцитов. Как будет показано ниже нашими исследованиями, при развитии синдрома СДДИМП при ЛХВП мы не наблюдали классических этапов развития фиброза печени: повреждения гепатоцитов, выделения ими биологически активных веществ, активации этими веществами макрофагов печени и эндотелия сосудов, выделения провоспалительных цитокинов, активации ими клеток Ито с трансформацией их в миофибробласты, способные секретировать коллаген и протеогликаны. При развитии синдрома СДДИМП при ЛХВП происходит изменение мезенхимальных производных в организме, приводящее, в том числе, к активации фибробластов и повышенной рекрутизации тканевых базофилов, которые способствуют пролиферации фибробластов и синтезу коллагена (Berton A, Levi-Schaffer F, Emonard H, Garbuzenko E, Gillery P, Maquart FX. Activation of fibroblasts in collagen lattices by mast cell extract: a model of fibrosis // Clin Exp Allerg. - 2000. - 30. - p.485-492; Garbuzenko E, Berkman N, Puxeddu I, Kramer M, Nagler A, Levi-Schaffer F. Mast cells induce activation of human lung fibroblasts in vitro // Exp Lung Res. - 2004. - 30. - p.705-721; Garbuzenko E, Nagler A, Pickholtz D, Gillery P, Reich R, Maquart FX, Levi-Schaffer F. Human mast cells stimulate fibroblast proliferation, collagen synthesis and lattice contraction: a direct role for mast cells in skin fibrosis // Clin Exp Allergy. - 2002. - 32. - p.237-246).

Развитие фиброза в печени при синдроме СДДИМП при ЛХВП идет следующим путем: повышенный выход плазматических клеток и базофилов в области триад → активация фибробластов и их пролиферация → продукция компонентов экстрацеллюлярного матрикса, в том числе коллагена и протеогликанов → нарушение организации соединительной ткани в печени.

Таким образом, развитие фиброза в печени при заболеваниях, когда этиологический фактор воздействует непосредственно на печень и при синдроме СДДИМП при ЛХВП, идет различными путями, поэтому известные современные средства, рассмотренные выше, будут малоэффективными при синдроме СДДИМП при ЛХВП.

Это обуславливает значимость разработки лечебно-профилактических мероприятий и средств, препятствующих разрастанию соединительной ткани в печени при синдроме СДДИМП при ЛХВП вне печени.

Из уровня техники известны исследования на животных, где на моделях острого повреждения печени показано, что гормон эпифиза - мелатонин - оказывает цитопротективный эффект за счет своей антиоксидантной способности, что в свою очередь ведет к меньшей выраженности фиброза печени (Tahan V, Ozaras R, Canbakan B, et al. Melatonin reduces dimethylnitrosamine-induced liver fibrosis in rats. J Pineal Res. 2004; 37:78-84; Cruz A, Padillo FJ, Torres E, et al. Melatonin prevents experimental liver cirrhosis induced by thioacetamide in rats. J Pineal Res. 2005; 39:143-150; Hong RT, Xu JM, Mei Q Melatonin ameliorates experimental hepatic fibrosis induced by carbon tetrachloride in rats. World J Gastroenterol. 2009 Mar 28; 15(12):1452-8; Tahan G, Akin H, Aydogan F, Ramadan SS, Yapicier O, Tarcin O, Uzun H, Tahan V, Zengin K. Melatonin ameliorates liver fibrosis induced by bile-duct ligation in rats. Can J Surg. 2010 Oct; 53(5):313-8).

Авторами данных работ были выявлены следующие эффекты мелатонина: уменьшение гибели гепатоцитов, уменьшение активации клеток Ито, меньшая выраженность фиброза печени.

Как уже было показано выше, при использовании моделей острого повреждения печени не наблюдается активация фибробластов рыхлой волокнистой неоформленной соединительной ткани портальных трактов и окружения центральных вен печени (наблюдаемая при синдроме СДДИМП при ЛХВП), поскольку для их активации необходим определенный период времени, связанный с рекрутизацией тканевых базофилов и активацией их плазматическими клетками, что в данных моделях отсутствует, но присутствует при синдроме СДДИМП при ЛХВП.

Поэтому авторами известных работ не было выявлено влияние мелатонина на активированные фибробласты и тучные клетки и на те механизмы развития фиброза, которые имеют место в случае синдрома СДДИМП при ЛХВП.

Раскрытие изобретений

Предлагается средство для предупреждения (профилактики) поражения печени при формировании синдрома сочетанных дистрофически-дегенеративных изменений мезенхимальных производных при локальном хроническом воспалительном процессе, находящемся вне печени (СДДИМП при ЛХВП, находящемся вне печени), представляющее собой гормон пинеальной железы - мелатонин.

Предлагаемый способ предупреждения (профилактики) поражения печени при формировании синдрома сочетанных дистрофически-дегенеративных изменений мезенхимальных производных при локальном хроническом воспалительном процессе (находящемся вне печени) (СДДИМП при ЛХВП) характеризуется тем, что в затемненном помещении перед сном в организм вводят мелатонин в эффективной дозе, например, в дозе 0,7-1,5 мг/кг веса, эффективным курсом, например, в течение 5-10 дней.

Технические результаты изобретения-средства и изобретения-способа:

1) профилактика поражения печени при формировании синдрома СДДИМП при ЛХВП: уменьшение микроциркуляторных нарушений; предотвращение дистрофических изменений паренхиматозных клеток, разрастания соединительной ткани, изменения строения стенок сосудов печеночных вен; предотвращение увеличения количества тучных клеток в окружении сосудов портальных трактов;

2) поскольку мелатонин является синтетическим аналогом гормона шишковидной железы (эпифиза), его токсичность низка, а побочные эффекты - минимальны.

Формула изобретения

1. Средство для профилактики поражения печени при формировании синдрома сочетанных дистрофически-дегенеративных изменений мезенхимальных производных при локальном хроническом воспалительном процессе, находящемся вне печени, представляющее собой мелатонин.

2. Способ профилактики поражения печени при формировании синдрома сочетанных дистрофически-дегенеративных изменений мезенхимальных производных при локальном хроническом воспалительном процессе, характеризующийся тем, что в затемненном помещении перед сном в организм вводят мелатонин в эффективной дозе, например, в дозе 0,7-1,5 мг/кг веса, эффективным курсом, например, в течение 5-10 дней.