СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ХИМИЧЕСКОГО ГАСТРИТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

Название	СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ХИМИЧЕСКОГО ГАСТРИТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
Разработчик (Авторы)	Шинкарик О.В., Аверьянова Н.И., Косарева П.В., Хоринко В.П.
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2395125
Дата регистрации	01.06.2009
Правообладатель	Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная медицинская академия имени академика Е.А. Вагнера Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию"

Описание изобретения

Изобретение относится к медицине, а именно к гастроэнтерологии, патологической физиологии и экспериментальной медицине и может быть использовано для изучения патогенеза химического гастрита и доклинического исследования эффективности новых методов лечения данной патологии.

На сегодняшний день известно несколько вариантов моделирования химического гастрита в эксперименте. Наиболее близким аналогом является способ моделирования химического гастрита у крыс-самцов линии Wistar путем одновременного введения животным нестероидных противовоспалительных препаратов и медицинской желчи (Кнышова В.В. Влияние борсодержащей минеральной воды на состояние процессов перекисного окисления липидов и факторов антиоксидантной защиты при экспериментальном гастродуодените // Вопросы курортологии, физиотерапии и ЛФК. - 2002. - №2. - С.34-36).

Недостатком данного способа является отсутствие таких патогномоничных для химического гастрита гистологических признаков, как гиперплазия ямочного эпителия с локальным истощением муцина, гипертрофия гладких мышц с минимально выраженными отеком и воспалением в собственной пластинке слизистой, увеличение в собственной пластинке слизистой оболочки желудка количества гладкомышечных клеток (Sobala, G.M. Reflux gastritis in the intact stomach / Sobala G.M., King R.F., Axon A.T., Dixon M.F. // J. Clin. Pathol. - 1990, Apr. - Vol.43. - 34. - P.303-306 Комптон К.К. Гастрит: новое в патоморфологической классификации и диагностике / К.К. Комптон // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 1998. - №3. - С.84-80). Напротив, автор отмечает появление диффузной лимфоцитарно-гистиоцитарной и плазмоклеточной воспалительной инфильтрации собственной пластинки слизистой, стазы и мелкоочаговые кровоизлияния, кубическую трансформацию покровного и железистого эпителия, что не характерно для химического гастрита. Поэтому в современных условиях разработка оптимального, приближенного к реальным условиям варианта моделирования химического гастрита является актуальной задачей.

Технический результат: создание модели, наиболее полно отражающей морфологическую картину поражения слизистой оболочки желудка при химическом гастрите у человека.

Указанная задача достигается путем перорального введения нелинейным белым крысам в течение 21 дня смеси 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата «Кеторол®» («Д-р Редди'с Лабораторис Лтд.», Индия, г.Хайдерабад, активное вещество - кеторолака трометамин) из расчета 5 мг/кг за 1 ч до кормления 1 раз в сутки.

Способ осуществляют следующим образом. Нелинейным белым крысам (самцам и самкам) в течение 21 дня перорально вводят смесь 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кеторол из расчета 5 мг/кг за 1 ч до кормления 1 раз в сутки. По окончании эксперимента животных забивают под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии, материал (стенку желудка) фиксируют в 10% забуференном по Лилли (pH - 7,2) формалине. Используя общепринятые методики, готовят гистологические препараты, в которых выявляют типичные гистологические признаки химического гастрита: гиперплазию ямочного эпителия с локальным истощением муцина, увеличение количества обкладочных (париетальных) клеток в дне желез слизистой оболочки пилорического отдела желудка, гипертрофию мышечной пластинки слизистой оболочки желудка, увеличение в собственной пластинке слизистой оболочки желудка количества гладкомышечных клеток, отек собственной пластинки слизистой оболочки.

Эксперимент выполнен на 30 животных - самцах и самках беспородных белых крыс четырехмесячного возраста, содержащихся в стандартных условиях вивария. Все эксперименты проведены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу Министерства здравоохранения СССР от 12.08.1977 г. N 755) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г.

Животные были разделены на 2 экспериментальных группы, состав групп был следующий:

I группа - контрольная (интактные животные), n=15;

II группа - животные, получавшие в течение 21 дня перорально 1 раз в сутки за 1 час до кормления смесь 200 мкл 5% раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата «Кеторол®» («Д-р Редди'с Лабораторис Лтд.», Индия) из расчета 5 мг/кг, n=15.

На 22-й день от начала эксперимента животных выводили из эксперимента путем перерезки спинного мозга под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии. При проведении аутопсии гистологические образцы, полученные из различных отделов желудка крысы (пищеводный, кардиальный, пилорический отделы), фиксировали в 10% забуференном по Лилли формалине (pH 7,2), обезвоживали в спиртах восходящей крепости, заливали в парафин, срезы (3-4 мкм) получали на ротационном микротоме, наносили на стекла с адгезивным покрытием (яичный альбумин), окрашивали гематоксилином и эозином и пикрофуксином по ван Гизону.

При проведении гистологического исследования у всех животных, получавших в течение 21 дня смесь 5% аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кеторол, отмечали появление гистологических признаков, патогномоничных для химического гастрита: гиперплазию ямочного эпителия с локальным истощением муцина, уменьшение количества главных клеток в дне желез слизистой оболочки пилорического отдела желудка, гипертрофию мышечной пластинки слизистой оболочки желудка, увеличение в собственной пластинке слизистой оболочки желудка количества гладкомышечных клеток и ее отек.

Положительный эффект от использования предлагаемого способа состоит в создании экспериментальной модели химического гастрита, обладающей 100%-ной воспроизводимостью и соответствующей по гистологической картине химическому гастриту, наблюдаемому у человека.

Формула изобретения

Способ моделирования химического гастрита в эксперименте путем перорального введения крысам нестероидного противовоспалительного препарата, отличающийся тем, что нелинейным белым крысам в течение 21 дня вводят смесь 200 мкл 5%-ного раствора аскорбиновой кислоты и нестероидного противовоспалительного препарата Кеторол из расчета 5 мг/кг за 1 ч до кормления, 1 раз в сутки.

Изобретение "СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ХИМИЧЕСКОГО ГАСТРИТА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ" (Шинкарик О.В., Аверьянова Н.И., Косарева П.В., Хоринко В.П.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога