СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОСТРОГО ПИЕЛОНЕФРИТА НА ФОНЕ ХОЛОДОВОГО СТРЕССА

Название	СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОСТРОГО ПИЕЛОНЕФРИТА НА ФОНЕ ХОЛОДОВОГО СТРЕССА
Разработчик (Авторы)	Аверьянова Н.И., Зимушкина Н.А., Косарева П.В., Кочинова Т.В., Логинова И.А., Самоделкин Е.И., Черешнев В.А.
Вид объекта патентного права	Изобретение
Регистрационный номер	2368016
Дата регистрации	09.01.2008
Правообладатель	Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Пермская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.Н. Прянишникова

Описание изобретения

Изобретение относится к медицине, а именно к патологической физиологии и нефрологии, и может быть использовано для изучения патогенеза пиелонефрита и доклинического исследования эффективности новых лекарственных препаратов для лечения инфекционно-воспалительной патологии органов мочевой системы, в том числе развившейся на фоне нарушения качественного состава кишечной микрофлоры.

Известные способы моделирования пиелонефрита основаны на создании нарушения почечной гемодинамики за счет курсового введения в организм экспериментальных животных (белых крыс) химических агентов, изменяющих синтез почечных простагландинов, и гематогенного инфицирования непатогенными штаммами бактерий - непатогенные штаммы кишечной палочки 0-111 (Ю.М.Есилевскнй, М.А.Пальцев, Э.С.Севергина и Д.Г.Уфимцева. Авторское свидетельство СССР 1097633, кл. G09В 23/28, 1982).

Согласно модели Э.М.Пармон с соавт. пиелонефрит моделируется путем инъекционного введения в область проекции почек культур патогенных микроорганизмов (Э.М.Пармон, B.C.Камышников, Е.Т.Зубовская, Л.К.Суркова, Т.А.Тимошенко, Т.В.Коваленко. / Изменение активности ферментов и спектра белков мочи при моделировании острого пиелонефрита // рецензируемый научно-практический ежегодник <Достижения медицинской науки Беларуси>, 2004; http://www.med.by/dn.htm). При проведении патоморфологического исследования при данном способе заражения в почках экспериментальных животных происходит формирование сливных гнойных очагов, свидетельствующих о развитии особой формы пиелонефрита - апостематозного, редко встречающегося в клинике.

Недостатки существующих способов моделирования пиелонефрита: способы моделирования пиелонефрита путем применения оперативного доступа к органам мочевой системы помимо развития у животного инфекционного процесса, являющегося конечной целью эксперимента, сопровождаются нанесением животному операционной травмы, что искажает регистрируемые в эксперименте показатели и тем самым уменьшает чистоту эксперимента и достоверность полученных результатов. К тому же при данных способах нередко развитие острого гнойного пиелонефрита, что нетипично для рядовой клинической ситуации.

В эксперименте показано, что стрессовое воздействие на организм вызывает диссеминацию кишечной флоры в кровяное русло (Бердичевский Б.А. с соавт., 1993). В связи с этим разработка модели гематогенного пиелонефрита, развившегося на фоне нарушенного кишечного микробиоценоза и стрессового воздействия, имеет особую актуальность.

Существуют различные способы моделирования у животных острого стресса. Был выбран способ острого холодового стресса, поскольку острое переохлаждение, приводящее к развитию воспалительного процесса в ткани почек, является частой клинической ситуацией.

Наиболее близким аналогом является модель, согласно которой пиелонефрит моделируется путем охлаждения животных в воде, имеющей температуру +5-6°, в течение часа, при этом ректальная (в прямой кишке) температура снижается всего на 2-2,5°С (Л.Г.Прокопенко, А.И.Лазарев, А.Р.Авакян. / Функционально-метаболическая активность лейкоцитов и ее коррекция лизоцимом при остром холодовом стрессе. // Антибиотики и химиотерапия. - 2002. - Т.47. - №12. - С.11-14).

Недостатками данного способа моделирования пиелонефрита является то, что гистологические признаки воспалительного процесса регистрируются в интерстиции и почечных канальцах и не выявляются в слизистой и строме лоханок и чашечек. Поэтому разработка экспериментальной модели острого пиелонефрита, максимально приближенной к реальным условиям, является актуальной научно-практической задачей.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание модели острого пиелонефрита с холодовым стрессом, воспроизводимой без технических трудностей, по этиопатогенезу, клиническому течению и лабораторным показателям идентичной воспалительному процессу в органах мочевой системы, наблюдаемому в клинике.

Сущность изобретения заключается в однократном ректальном введении лабораторному животному (белой крысе) микробной суспензии уропатогенного штамма лактозонегативной Escherichia coli, изолированного из мочи пациента с клинической картиной острого пиелонефрита, с последующим острым холодовым стрессовым воздействием при t°=0+2°С в течение 2-х часов.

Новым в способе является то, что заражение экспериментального животного - беспородной белой крысы - осуществляется путем ректального введения микробной суспензии с последующим однократным стрессовым воздействием в форме острого холодового стресса; с целью увеличения вероятности развития у животного воспалительного процесса в почках для заражения используются клинические изоляты бактерий, обладающие уропатогенными свойствами и вызывающие у экспериментального животного воспалительный процесс в органах мочевой системы, подтверждаемый данными лабораторных, морфологических и микробиологических исследований.

Способ осуществляется следующим образом. Для моделирования пиелонефрита используются беспородные белые крысы, содержащиеся в стандартных условиях вивария. Лабораторному животному однократно ректально в виде клизмы, после опорожнения кишечника, вводят суточную бульонную культуру уропатогенного штамма лактозонегативной Escherichia, coli, изолированного из мочи пациента с клинической картиной острого пиелонефрита, в концентрации 10⁵-10⁷ КОЕ/ мл, определяемой нефелометрическим методом (оптическая плотность бактериальной суспензии в мясопептонном бульоне - 0,012 и 0,026 соответственно, длина волны 540 нм, кювета - 1,060 мм). В последующие за заражением сутки животное подвергают острому холодовому стрессу: t°=0+2°С в течение 2-х часов, способствующим диссеминации бактерий в кровяное русло и развитию острого пиелонефрита.

Предлагаемая модель пиелонефрита позволяет воспроизводить инфекционно-воспалительный процесс в почках, подобный наблюдаемому в клинике, поскольку для заражения животных используется «дикий» уропатогенные лактозонегативной Escherichia coli, отсутствует нанесение животному операционной травмы и в результате эксперимента выявляются гистологические изменения в почках, характерные для острого негнойного пиелонефрита с вовлечением в воспалительный процесс не только интерстициальной ткани, но и собирательной системы почек - лоханок и чашечек. Преимуществом предлагаемого способа (по сравнению с известными) является более адекватное воспроизведение инфекционно-воспалительного процесса в почках, более высокая воспроизводимость модели, удешевление ее стоимости.

Формула изобретения

Способ моделирования острого пиелонефрита путем охлаждения лабораторного животного, отличающийся тем, что для моделирования пиелонефрита однократно ректально в виде клизмы, после опорожнения кишечника, лабораторному животному вводят суточную бульонную культуру уропатогенного штамма клинического изолята лактозонегативной Escherichia coli в концентрации 10⁵-10⁷ КОЕ/мл, выделенную из мочи пациента с острым пиелонефритом и обладающую уропатогенными свойствами, и на следующий после заражения день подвергают острому холодовому стрессу при t°=0+2°C в течение 2 ч.

Изобретение "СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОСТРОГО ПИЕЛОНЕФРИТА НА ФОНЕ ХОЛОДОВОГО СТРЕССА" (Аверьянова Н.И., Зимушкина Н.А., Косарева П.В., Кочинова Т.В., Логинова И.А., Самоделкин Е.И., Черешнев В.А.) отмечено юбилейной наградой (25 лет Российской Академии Естествознания)
Медаль Альфреда Нобеля

Оформление наградных документов и заказ каталога