L международная выставка-презентация
научных, технических, учебно-методических и литературно-художественных изданий
СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОСТРОГО ПИЕЛОНЕФРИТА
| Название | СПОСОБ МОДЕЛИРОВАНИЯ ОСТРОГО ПИЕЛОНЕФРИТА |
|---|---|
| Разработчик (Авторы) | Аверьянова Н.И., Звездаков В.В., Зимушкина Н.А., Косарева П.В., Логинова И.А., Самоделкин Е.И., Черешнев В.А., Чигалейчик А.В. |
| Вид объекта патентного права | Изобретение |
| Регистрационный номер | 2349965 |
| Дата регистрации | 17.07.2007 |
| Правообладатель | Федеральное государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования Пермская государственная сельскохозяйственная академия имени академика Д.Н. Прянишникова |
Описание изобретения
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно к экспериментальной нефрологии, и может быть использовано для моделирования острого пиелонефрита. Для этого лабораторным крысам внутрибрюшинно однократно вводят клинический изолят Escherichia coli или Staphylococcus saprophyticus в концентрации 106-109 КОЕ/мл. При этом изолят выделяют из мочи пациента с острым пиелонефритом. Способ обеспечивает адекватное воспроизведение модели за счет использования уропатогенного штамма при исключении нанесения животному операционной травмы.
Изобретение относится к медицине, а именно к патологической физиологии и нефрологии, и может быть использовано для изучения патогенеза острого пиелонефрита и исследования эффективности новых лекарственных препаратов для лечения инфекционно-воспалительных заболеваний органов мочевой системы в доклинических экспериментах.
Известные способы моделирования пиелонефрита основаны на создании нарушения почечной гемодинамики за счет курсового введения в организм экспериментальных животных (белых крыс) химических агентов, изменяющих синтез почечных простагландинов, и гематогенного инфицирования непатогенными штаммами бактерий - непатогенные штаммы кишечной палочки 0-111 (Ю.М.Есилевский, М.А.Пальцев, Э.С.Севергина и Д.Г.Уфимцева. Авторское свидетельство СССР №1097633, кл. G09В 23/28, опубл. 1982). При моделировании пиелонефрита по методу Лукьянова А.В., Долгих В.Т., Потиевского Э.Г., Рейс Б.А., Соколова Т.О., Никонова В.М. (Бюллетень сибирской медицины, 2004. №6, с.42-46) крысам культура коллекционного штамма кишечной палочки (гемолизирующая Е.coli с колицинотипом Са 38) вливается через стенку мочевого пузыря под визуальным контролем после предварительной лапаротомии, то есть с применением оперативных методов. При этом гистологические признаки воспалительного процесса регистрируются преимущественно в интерстиции почек и почечных канальцах и не выявляются в слизистой и строме лоханок и чашечек.
Наиболее близким аналогом является модель, согласно которой пиелонефрит моделируется путем введения лабораторным крысам в область проекции почек микробной суспензии штамма (Escherichia coli или Staphylococcus aureus (Э.М.Пармон, B.C.Камышников, Е.Т.Зубовская, Л.К.Суркова. Т.А.Тимошенко, Т.В.Коваленко. / Изменение активности ферментов и спектра белков мочи при моделировании острого пиелонефрита // рецензируемый научно-практический ежегодник <Достижения медицинской науки Беларуси>, 2004; http://www.med.by/dn.htm). При проведении патоморфологического исследования при данном способе заражения в почках лабораторных крыс происходит формирование сливных гнойных очагов, свидетельствующих о развитии особой формы пиелонефрита - апостематозного пиелонефрита, редко встречающегося в клинике.
Недостатками существующих способов моделирования пиелонефрита путем применения оперативного доступа к органам мочевой системы являются, помимо развития у лабораторных крыс инфекционного процесса, являющегося конечной целью эксперимента, нанесение животному операционной травмы, что искажает регистрируемые в эксперименте показатели и тем самым уменьшает чистоту эксперимента и достоверность полученных результатов. К тому же при данных способах нередко развитие острого гнойного пиелонефрита, что нетипично для рядовой клинической ситуации. Способы гематогенного заражения подразумевают, как правило, использование в качестве инфекционного агента непатогенных, коллекционных штаммов, не имеющих тропности к уроэпителию, применение которых также не позволяет создать у животного типичной клиники острого пиелонефрита. Кроме того, гистологические признаки воспалительного процесса регистрируются в интерстиции и почечных канальцах и не выявляются в слизистой и строме лоханок и чашечек. Поэтому разработка экспериментальной модели острого пиелонефрита, максимально приближенной к реальным условиям, является актуальной научно-практической задачей.
Техническим результатом предлагаемого изобретения является создание модели острого пиелонефрита, воспроизводимой без технических трудностей, по этиопатогенезу, клиническому течению и лабораторным показателям идентичной воспалительному процессу в органах мочевой системы, наблюдаемому в клинике, и не сопровождающейся нанесением животному операционной травмы.
Сущность изобретения заключается в однократном внутрибрюшинном введении лабораторным крысам клинического изолята Escherichia coli или Staphylococcus saprophyticus концентрации 10-6-109 КОЕ/мл, выделенных из мочи пациентов с острым пиелонефритом, подтвержденным клиническими и лабораторными данными, и обладающих уропатогенными свойствами.
Новым в способе является то, что заражение экспериментального животного - самки белой беспородной крысы - осуществляется путем однократного внутрибрюшинного введения микробной суспензии, что позволяет получить воспалительные изменения в почках экспериментальных животных, идентичные наблюдаемым в клинике без нанесения животному операционной травмы; с целью увеличения вероятности развития у животного воспалительного процесса в почках для заражения используется клинические изоляты Staphylococcus saprophyticus или Escherichia coli, обладающие уропатогенными свойствами и вызывающие у экспериментального животного воспалительный процесс в органах мочевой системы, подтверждаемый данными лабораторных, морфологических и микробиологических исследований.
Способ осуществляется следующим образом. Для моделирования пиелонефрита используются самки беспородных белых крыс, содержащиеся в стандартных условиях вивария. Лабораторному животному однократно интраперитонеально вводят суточную бульонную культуру уропатогенных штаммов лактозонегативной Escherichia coli или Staphylococcus saprophyticus, изолированных из мочи пациентов с клинической картиной острого пиелонефрита, подтвержденного лабораторными данными. Культуры используемых для заражения штаммов вводятся в концентрации 106-109 КОЕ/мл, определяемой нефелометрическим методом (оптическая плотность бактериальной суспензии в мясопептонном бульоне для Escherichia coli - 0,012-0,026, для Slaphylococcus saprophyticus - 0,015-0,028, длина волны 540 нм, кювета - 1,060 мм).
Предлагаемая модель пиелонефрита позволяет воспроизводить инфекционно-воспалительный процесс в почках, подобный наблюдаемому в клинике, поскольку для заражения животных используются уропатогенные штаммы - клинические изоляты Staphylococcus saprophyticus и лактозонегативной Escherichia coli, отсутствует нанесение животному операционной травмы, и в результате эксперимента выявляются гистологические изменения в почках, характерные для острого негнойного пиелонефрита с вовлечением в воспалительный процесс не только интерстициальной ткани, но и собирательной системы почек - лоханок и чашечек. Преимуществом предлагаемого способа (по сравнению с известными) является более адекватное воспроизведение инфекционно-воспалительного процесса в почках, более высокая воспроизводимость модели, удешевление ее стоимости.
Формула изобретения
Способ моделирования острого пиелонефрита путем введения лабораторным крысам микробной суспензии уропатогенного штамма (лактозонегативной Escherichia coli или Staphylococcus saprophyticus), отличающийся тем, что для моделирования пиелонефрита лабораторным крысам внутрибрюшинно однократно вводят клинический изолят Escherichia coli или Staphylococcus saprophyticus в концентрации 106-109 КОЕ/мл, выделенный из мочи пациента с острым пиелонефритом и обладающий уропатогенными свойствами.
Медаль Альфреда Нобеля