L международная выставка-презентация
научных, технических, учебно-методических и литературно-художественных изданий
СПОСОБ ОТБОРА ЛИЦ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИММУНОСТИМУЛЯТОРАМИ
| Название | СПОСОБ ОТБОРА ЛИЦ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИММУНОСТИМУЛЯТОРАМИ |
|---|---|
| Разработчик (Авторы) | Черешнев В.А., Рочев В.П., Аверьянова Н.И. |
| Вид объекта патентного права | Изобретение |
| Регистрационный номер | 2007722 |
| Дата регистрации | 15.02.1994 |
| Правообладатель | Институт экологии и генетики микроорганизмов Уральского отделения РАН |
Описание изобретения
Использование: медицина, иммунология, отбор лиц для лечения иммуностимуляторами. Цель - повышение точности отбора. Сущность изобретения: исследуют цельную кровь, взятую из пальца, к которой добавляют лекарственный препарат, обладающий иммуностимулирующими свойствами, определяют антигенблокирующую активность крови, затем по уровню неспецифического изменения антимикробной активности крови делят обследуемых на две группы и лицам первой группы с повышенной антимикробной активностью проводят лечение иммуностимуляторами.
Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и предназначено для отбора лиц для лечения иммуностимуляторами.
Прототипом исследований является методика исследования фагоцитарной активности лейкоцитов.
Цель изобретения - упрощение способа.
Указанная цель достигается путем определения иммунологического статуса по уровню антимикробной активности капиллярной крови в присутствии биологически активного вещества в реакции торможения пассивной гемаглютинации (РТ ПГА), при этом кровь обрабатывают микробным антигеном и биологически активным веществом, взятом в концентрации, подобранной предварительно при исследовании "доза-эффект", а отбор пациентов для лечения иммуностимуляторами проводят в случае увеличения антимикробной активности крови в сравнении с пробой, в которую биологически активное вещество не добавляли.
Способ осуществляется следующим образом.
В центрифужную пробирку к 0,1 мл крови, взятой из пальца обследуемого лица и стабилизированной гепарином из расчета 50 АЕ, добавляют 0,1 мл раствора, содержащего биологически активное вещество. Концентрацию этого вещества подбирают в предварительных исследованиях "доза - эффект". Установлено, что дибазол повышает антимикробную активность крови в дозе 0,1-0,01 мг/мл, глюкоза - 10-20 ммоль/л, левамизол - 0,2-0,02 мг/мл. В контрольную пробирку с кровью приливают 0,1 мл физраствора. Пробы смешивают и выдерживают при температуре 36,5-37оС в течение 20-30 мин. Затем для оценки агнтимикробной активности крови к пробам добавляют по 0,1 мл раствора антигена Мигелл Зонне, Ньюкестл, Флекнера и другие с высокой активностью, составляющей 8,0 и более АЕ/0,1 мл в РТПГА. Эта доза антигена полностью блокирует активность гуморальных и клеточных факторов крови и частично сохраняет свою активность в отношении индикаторной дозы иммунной сыворотки. Пробы смешивают и обрабатывают при температуре 36,5-37,0оС в течение 10-15 мин, затем охлаждают при температуре 3-5оС в течение 25-30 мин и приливают к пробам иммунную сыворотку, специфичную к антигену, титром 8,0 и более в РПГА.
Раствор иммунной сыворотки готовят из 0,1 мл неадсорбированной иммунной сыворотки, приложенной к антигенному эритроцитарному диагностикуму для контрольных исследований. С этой целью сыворотку разводят в 5-6 мл физического раствора и для осаждения ее конгломератов центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 мин. Надосадочный раствор иммунной сыворотки разводят в 100 мл физраствора. Определяют титр антител по инструкции с использованием макроварианта постановки РПГА. При необходимости в день исследования сыворотку дополнительно разводят физраствором.
Одновременно ставят контрольные исследования. Для этой цели к 0,1 мл раствора антигена, использованного для определения антимикробной активности крови, добавляют 0,2 мл физраствора. Контролем является проба с содержанием 0,3 мл физраствора.
После добавления иммунной сыворотки к смеси и контрольным пробам их обрабатывают при температуре 3-5оС в течение 20-30 мин, затем центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5 мин. Надосадочный раствор с остаточной активности сыворотки переносят в лунку первого ряда планшета для макроварианта постановки РПГА и определяют антимикробную активность крови по остаточной активности антигена в АЕ РТПГА.
Заявляемый способ отличается малой трудоемкостью: при серийных исследованиях для определения одного показателя антимикробной активности крови требуется не более 10 мин, экспрессностью - результаты исследований известны через несколько часов после опытов; экономичностью - для определения антимикробной активности крови не требуются дорогостоящие реактивы, аппаратура и т. д.
В то же время способ определения фагоцитоза в стадии подсчета результатов исследований, особенно микроскопическим методом, отличается субъективностью, большой трудоемкостью. При изучении фагоцитоза требуются растворы для фиксации и покраски мазков.
Важным преимуществом заявляемого способа является то, что авторами впервые в медицине обосновывается универсальный характер неспецифического изменения антимикробной активности крови при ее взаимодействии ин витро с биологически активными веществами (иммуностимуляторами, адаптогенами) и при лечении больных этими препаратами. Эта универсальность проявляется прежде всего тем, что независимо от адаптогена и нозологической единицы заболевания отмечается высокая обратная корреляция уровня повышения антимикробной активности крови от ее исходной величины ин витро и при лечении больных этим препаратом. В тоже время наблюдается прямая зависимость между уровнями повышения антимикробной активности крови ин витро и после лечения больных адаптогенами.
Выявленный унвиверсальный характер повышения антимикробной активности крови под влиянием адаптогенов позволяет значительно повысить точность, упростить отбор лиц для лечения адаптогенами и иммуностимуляторами.
Дополнительным преимуществом заявляемого способа является то, что при отборе лиц для лечения адаптогенами используется оригинальная методика определения антимикробной активности крови. Эта методика в сравнении с известными в иммунологии способами отражает интегральный результат взаимодействия крови с микробным антигеном - позволяет одномоментно оценить способность гуморальных и клеточных факторов крови, блокировать активность антигена. Показатель антимикробной активности крови на 80% состоит из активности блокированного антигена гуморальными факторами крови и около 20% приходится на ее клеточные элементы - эритроциты, фагоциты и др. Указанное преимущество заявляемого способа с учетом ее высокой точности, экономичности и малой трудоемкости позволяет его использовать для отбора лиц с целью лечения иммуностимуляторами и адаптогенами. (56) Иммунология. Практикум. Киев. 1989, с. 265-275.
Формула изобретения
СПОСОБ ОТБОРА ЛИЦ ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ ИММУНОСТИМУЛЯТОРАМИ, включающий исследование иммунологического статуса больного с последующим сопоставлением полученного показателя с контролем, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, иммунологический статус определяют по уровню антимикробной активности капиллярной крови в присутствии биологически активного вещества в реакции торможения пассивной гемагглютинации, при этом кровь обрабатывают микробным антигеном и биологически активным веществом, взятым в концентрации, подобранной предварительно при исследовании зависимости доза - эффект, а отбор пациентов для лечения иммуностимуляторами проводят в случае увеличения антимикробной активности крови в сравнении с пробой, в которую биологически активное вещество не добавляли.
Медаль Альфреда Нобеля